出血性大肠埃希氏菌 O157：H7

产品名称：出血性大肠埃希氏菌 O157：H7

英文名：Escherichia coli EHEC O157：H7

规格：冻干粉；斜面；菌液；平板

货号：PJZ730

作用：研究、质量控制，GB 4789.36-2016大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验

形态：菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面乳白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

基本信息：

培养基  蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)

生长条件  37℃；18-24h；好氧

生长特性  G-杆菌，赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶均阳性，精氨酸双水解酶阴性，有动力，IMViC实验：+、+、-、-，尿素酶、苯丙氨酸脱氨酶阴性，不产H2S，不发酵山梨醇、纤维二糖和侧金盏花醇，MUG阴性，发酵乳糖、甘露醇。兼性厌氧，最适pH7.4~7.6。血清型：O 157 : H 7。

存储条件  2-8℃

安全等级  2

形态  菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面乳白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

模式菌株  no

操作步骤  ①准备上述平板 1-2 块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  研究、质量控制，GB 4789.36-2016大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验

共享方式  公益性共享

产品描述：

出血性大肠埃希氏菌O157：H7是肠道出血性大肠埃希氏菌的主要血清型，属于革兰氏阴性杆菌。它广泛存在于动物肠道中，主要通过污染的食物（如肉类、乳制品、蔬菜等）和水传播给人类，引起出血性结肠炎。患者感染后主要表现为剧烈腹痛、水样便、血便等症状，严重时可引发溶血性尿毒综合征，导致肾功能衰竭、血小板减少和溶血性贫血，甚至死亡，尤其对儿童和老年人危害较大。

准备工作：

环境与器材消毒：

在生物安全柜或超净工作台中操作。提前打开紫外灯照射30分钟。

准备75%酒精喷洒双手和工作台面。

准备所需器材：无菌接种环、酒精灯、无菌吸管、涂布棒、试管架、打火机等。

培养基准备：

根据菌种类型选择合适的培养基（如营养琼脂、血平板、LB培养基等）。

将培养基从冰箱取出，恢复至室温或进行预热。

个人防护：

穿戴实验服、手套、口罩。需在生物安全柜中操作并佩戴护目镜。

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菌株复活步骤：

1. 冻干粉（安瓿管）复活

这是最稳定的保存形式，但菌体处于休眠状态，复活需谨慎。

表面消毒：用75%酒精棉擦拭冻干管外壁。

开启冻干管：

用砂轮在管身中部划一道痕。

将划痕处用酒精棉擦拭消毒。

手持两端轻轻掰断（或用镊子轻敲），注意防护玻璃碎渣。

溶解菌粉：

用无菌吸管吸取 0.3-0.5 mL 液体培养基（或无菌水）。

注入冻干管内，反复吸打使菌粉完全溶解成悬液。

接种：

关键原则：首次复活请勿分接多个平板，以免因接种量不足导致复苏失败。

涂布法：将全部菌悬液滴加到平板上，用无菌涂布棒涂布均匀。

划线法：用接种环蘸取菌悬液，在平板上进行分区划线。

培养：立即放入对应条件的培养箱中。

2. 冷冻甘油管（-80℃/-20℃）复活

解冻原则：避免反复冻融。

正确做法：从冰箱取出后，无需完全融化，直接用无菌接种环或枪头在表面刮取少量冰屑即可。

错误做法：将整管完全融化后再冷冻，会导致菌体死亡。

接种：将刮取的冰屑直接在平板上划线。

原管放回：操作完后迅速将冻存管放回低温冰箱。

3. 斜面/平板（4℃保存）复活

状态：菌种处于活性状态，可直接使用。

接种：用灼烧冷却后的接种环直接挑取单个菌落或菌苔。

注意：4℃保存的菌种需定期传代（一般每月一次），传代次数不宜过多（通常不超过6次），以防老化或变异。