贝雷兹不动杆菌

商品属性：

产品描述：

贝雷兹不动杆菌是常见的革兰氏阴性条件致病菌，无芽孢、无鞭毛，多数有荚膜，营养要求不高，在普通培养基上即可生长。它广泛存在于自然环境和医院环境中，抵抗力强，对干燥、紫外线、多种消毒剂有一定耐受性，可在医院环境中长期存活。主要感染免疫力低下人群，引发肺炎、尿路感染、败血症等疾病，且易出现多重耐药情况，部分菌株甚至对多数常用抗生素耐药。培养条件为37℃好氧培养18 - 24小时，菌落直径1 - 2mm，呈圆形，边缘整齐，不透明，正面黄色且颜色较浅，中间凸起，表面光滑、明亮，质地湿润，易挑起。
培养基  胰蛋白胨：17.0，大豆胨：3.0，氯化钠：5.0，磷酸氢二钾：2.5，葡萄糖：2.5g，pH：7.3±0.2（25℃）

生长条件  37℃；18-24h；好氧；

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面黄色，颜色较浅，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯

模式菌株  no

操作步骤  ①准备2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解后，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

共享方式  公益性共享

准备工作：

环境与器材消毒：

在生物安全柜或超净工作台中操作。提前打开紫外灯照射30分钟。

准备75%酒精喷洒双手和工作台面。

准备所需器材：无菌接种环、酒精灯、无菌吸管、涂布棒、试管架、打火机等。

培养基准备：

根据菌种类型选择合适的培养基（如营养琼脂、血平板、LB培养基等）。

将培养基从冰箱取出，恢复至室温或进行预热。

个人防护：

穿戴实验服、手套、口罩。需在生物安全柜中操作并佩戴护目镜。

菌株复活步骤：

1. 冻干粉（安瓿管）复活

这是最稳定的保存形式，但菌体处于休眠状态，复活需谨慎。

表面消毒：用75%酒精棉擦拭冻干管外壁。

开启冻干管：

用砂轮在管身中部划一道痕。

将划痕处用酒精棉擦拭消毒。

手持两端轻轻掰断（或用镊子轻敲），注意防护玻璃碎渣。

溶解菌粉：

用无菌吸管吸取 0.3-0.5 mL 液体培养基（或无菌水）。

注入冻干管内，反复吸打使菌粉完全溶解成悬液。

接种：

关键原则：首次复活请勿分接多个平板，以免因接种量不足导致复苏失败。

涂布法：将全部菌悬液滴加到平板上，用无菌涂布棒涂布均匀。

划线法：用接种环蘸取菌悬液，在平板上进行分区划线。

培养：立即放入对应条件的培养箱中。

2. 冷冻甘油管（-80℃/-20℃）复活

解冻原则：避免反复冻融。

正确做法：从冰箱取出后，无需完全融化，直接用无菌接种环或枪头在表面刮取少量冰屑即可。

错误做法：将整管完全融化后再冷冻，会导致菌体死亡。

接种：将刮取的冰屑直接在平板上划线。

原管放回：操作完后迅速将冻存管放回低温冰箱。

3. 斜面/平板（4℃保存）复活

状态：菌种处于活性状态，可直接使用。

接种：用灼烧冷却后的接种环直接挑取单个菌落或菌苔。

注意：4℃保存的菌种需定期传代（一般每月一次），传代次数不宜过多（通常不超过6次），以防老化或变异。

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