重组表达原理:
基因克隆?:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达?:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化?:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存?:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
作为去泛素化酶家族(DUBs)的重要成员,USP33在细胞内主要发挥去泛素化酶活性,通过移除底物蛋白上的泛素链来阻止其被蛋白酶体降解,从而稳定靶蛋白并调控多种生理过程。其核心功能涉及调控Slit-Robo信号通路——通过去泛素化并稳定Robo1受体,抑制结直肠癌细胞的迁移和上皮-间质转化(EMT),发挥抑癌作用;此外,USP33还能在DNA损伤应答中稳定p53蛋白,参与细胞周期调控和基因组稳定性维持。该重组蛋白广泛应用于肿瘤发生机制、DNA损伤修复及神经发育等领域的分子生物学研究和药物筛选。
产品名称; Recombinant Human USP33
别名; Deubiquitinating enzyme 33, EC 3 1 2 15, hVDU1, KIAA1097, MGC16868, OTTHUMP00000011234, OTTHUMP00000011330, OTTHUMP00000011331, pVHL interacting deubiquitinating enzyme 1, Ubiquitin carboxyl terminal hydrolase 33, Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 33, Ubiquitin specific peptidase 33, Ubiquitin specific processing protease 33, ubiquitin specific protease 33, Ubiquitin thioesterase 33
宿主; E.Coli
表达区间; 286-472
分子量; 41.9 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理?
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度?
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择?
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度?
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式?
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器?,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
肽酶抑制剂15 | 白细胞分类染色试剂盒 |
FITC标记小鼠CD2单克隆 | 石蜡切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
茶叶维生素U(S-Methylmethionine)比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞JNK/SAPK蛋白表达比色法定量酶联免疫试剂盒 |
细胞人体鼻病毒(rhinovirus)定量PCR扩增pcr检测试剂盒 | 糖果糖精(saccharin)含量高效液相色谱法定量酶联免疫试剂盒 |
体液肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A/肿瘤坏死因子α诱导蛋白4抗体 |
含赖氨酸卷曲螺旋蛋白1 | 二肽酶2抗体 |
植物线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 | 间接染色试剂盒 |
AMCA蛋白标记试剂盒 | 体液腺苷酸环化酶(Adenylate Cyclase)活性酶连续循环比色法定量pcr检测试剂盒 |
自噬相关蛋白8A | 原癌基因CD39样蛋白4/ENTPD5抗体 |
间隙连接蛋白47 | 7号染色体开放阅读框69抗体 |
RNA结合蛋白18 | 磷酸化C端结合蛋白1抗体 |
PerCP-Cy5.标记的胞质紧密粘连蛋白1/闭锁小带蛋白1 | Recombinant Human USP33白细胞介素17受体E抗体 |
组织半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 | KCNH4蛋白抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: USP33;41.9 kDa ; 286-472;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。