操作要点：
电泳条件?：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?转膜参数?：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
?抗体选择?：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
?显色方式?：ECL化学发光法，预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议?：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
该蛋白属于高度保守的14-3-3蛋白家族，其核心功能是作为适配蛋白，特异性识别并结合多种磷酸化丝氨酸/苏氨酸模体，从而调节下游靶蛋白的活性、稳定性及亚细胞定位。YWHAE广泛参与细胞代谢、蛋白质转运、凋亡及细胞周期等 vital 生命过程。研究表明，它能与CDC25磷酸酶、RAF1及IRS1等多种信号分子相互作用，在胰岛素敏感性调节和细胞分裂中发挥重要作用，并与小细胞肺癌等多种疾病的发生发展密切相关。因此，重组人YWHAE是探索信号转导网络、肿瘤机制及开发潜在治疗策略的重要分子工具。
产品名 | Recombinant Human YWHAE | 分子量 | 49.8 kDa |
表达区间 | 1-255 | 货号 | XG-DB3847 |
别名
14 3 3 E, 14 3 3 epsilon, 14 3 3E, 14-3-3 protein epsilon, 14-3-3E, 1433E_HUMAN, Epididymis luminal protein 2, FLJ45465, FLJ53559, HEL2, KCIP 1, KCIP1, MDCR, MDS, Mitochondrial import stimulation factor L subunit, Protein kinase C inhibitor protein1, Tyrosine 3 monooxygenase/tryptophan 5 monooxygenase activation protein, epsilon, Tyrosine 3 monooxygenase/tryptophan 5 monooxygenase activation protein
宿主; E.Coli
表达区间; 1-255
分子量; 49.8 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明：
复溶方法?: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
?应用建议?:
?实验用途?: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
?浓度调整?: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆?：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
?宿主表达?：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
?蛋白纯化?：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
?冻干保存?：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品：
同源盒蛋白HOXC9 | 液相法去内毒素试剂盒 |
连接蛋白3 | 通用抗原修复处理试剂盒 |
Bradford大量蛋白质浓度定量试剂盒 | 组织钙离子浓度荧光定量酶联免疫试剂盒 |
细胞PDGFRα激酶活性定量pcr检测试剂盒（A/B/C） | 血液一氧化氮合成酶总活性荧光定量酶联免疫试剂盒 |
果类果胶生物酶比色法定量pcr检测试剂盒 | 白细胞介素18结合蛋白抗体 |
肝细胞核因子4α | G蛋白信号调节蛋白1抗体 |
DAP KINASE蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 组织切割酶/β分泌酶（MENAPSIN 2；β－SECRETASE）活性 |
3－甲基－2－苯并噻唑腙盐酸盐（3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone；MBTH） | CCK-1(水溶性四氮唑－1 )比色法细胞繁殖测定试剂盒 |
转录调节蛋白BACH1 | FAM167A蛋白抗体 |
基质金属蛋白酶21 | 膜内蛋白酶4抗体 |
PE-Cy7标记人CD14单克隆 | 低密度脂蛋白受体相关蛋白10抗体 |
通用型HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定性pcr检测试剂盒 | Recombinant Human YWHAE异染色质蛋白1-γ/HP-1γ抗体 |
AF594标记的孤儿核受体蛋白Nur77抗体 | APC标记人CD95单克隆抗体 |
重组蛋白生产流程：
通常包括以下几个核心步骤：
基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。
构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。
纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。
关键字： YWHAE;49.8 kDa; 1-255;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域，利用互联网、数据分析及自动化技术，包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品，截止至2024年5月，西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景，西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力，更加重视本土化，建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活，能快速响应客户需求的产品。