重组蛋白(Recombinant Protein):

是指利用重组DNA或RNA技术,在体外人工制造的蛋白质。
这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段,插入到重组表达载体中,然后导入宿主细胞(如细菌、酵母、哺乳动物细胞等),
利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。
产品概述:

作为C2H2型锌指蛋白家族成员,ZNF518A在细胞内主要作为转录调节因子发挥作用。其核心功能是参与基因沉默过程,通过与组蛋白甲基转移酶复合物(如EHMT1/2和PRC2)相互作用,介导靶基因启动子区域组蛋白尾部的抑制性甲基化修饰(如H3K9me2/me3),从而调控染色质结构和基因表达。研究表明,ZNF518A在细胞分化、发育过程及肿瘤发生发展中扮演重要角色,其异常表达与多种癌症(如胃癌、肝癌)的进展和不良预后密切相关。该重组蛋白广泛应用于表观遗传学、转录调控机制及肿瘤分子生物学等领域的研究。
产品名 | Recombinant Human ZNF518A | 分子量 | 31.4 kDa |
表达区间 | 495-780 | 货号 | XG-DB3877 |
别名
Z518A_HUMAN, Zinc finger protein 518, Zinc finger protein 518A, ZNF518, ZNF518A
宿主; E.Coli
表达区间; 495-780
分子量; 31.4 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法?: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
?应用建议?:
?实验用途?: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
?浓度调整?: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆?:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
?宿主表达?:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
?蛋白纯化?:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
?冻干保存?:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
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操作要点:

电泳条件?:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?转膜参数?:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择?:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式?:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议?:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
存储条件:

冻干状态?: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
?复溶后?: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
?注意事项?: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
关键字: ZNF518A;31.4 kDa ;495-780;
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