重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组牛TNF-α(Recombinant Bovine TNF-α, rBoTNF-α)是一种通过基因工程技术在酵母表达系统中生产的高纯度科研用蛋白。该蛋白为无载体蛋白的冻干粉末形式,分子量约为17.4 kDa,纯度经SDS-PAGE分析大于95%。其氨基酸序列与牛(Bos taurus)、美洲野牛、水牛等反刍动物的天然TNF-α具有100%同源性,在L929细胞毒性测定中表现出高生物活性(ED50为5-8 ng/mL)。
产品名 | Recombinant Bovine TNFA | 分子量 | 17.4 KDa |
表达区间 | 78-234 | 货号 | XG-DB1009 |
别名
APC1 protein, Cachectin, Cachetin, DIF, TNF, TNF, monocyte-derived, tnfa, tnf-a, TNFalpha, TNF-alpha, TNF-alphacachectin, TNFATNF, macrophage-derived, TNFSF1A, TNFSF2, TNFSF2TNF superfamily, member 2, tumor necrosis factor (TNF superfamily, member 2), tumor necrosis factor alpha, Tumor necrosis factor ligand superfamily member 2, tumor necrosis factor, tumor necrosis factor-alpha
宿主; E.Coli
表达区间; 78-234
分子量; 17.4 KDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件?:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?转膜参数?:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
?抗体选择?:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
?显色方式?:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
?内参建议?:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
?安全提示?: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝氨酸/苏氨酸激酶TLK2 | 非同位素HRP化学发光法DNA南方杂交试剂盒 |
DHX8蛋白 | 石蜡切片组织INSULIN R-ALPHA 蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
蛋类羟丁酸待测样品处理试剂盒 | 冰冻切片组织P35蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
芳族氨基酸脱羧酶(Aromatic Amino Acid Decarboxylase)活性 | 8%蛋白电泳分离预制胶溶液 |
细胞PIM1激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 磷酸化粘着斑激酶抗体 |
附睾特异蛋白10 | 肠型脂肪酸结合蛋白抗体 |
细胞培养悬液氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量pcr检测试剂盒 | 组织甘肽(GLUTATHIONE)总浓度荧光定量pcr检测试剂盒 |
1摩尔 HEPES pH7.2分子生物级溶液 | 组织EPHB2激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) |
中心体和纺锤体极相关蛋白1 | 嗅觉受体5K1抗体 |
环指蛋白160 | 2号染色体开放阅读框62抗体 |
N聚糖酶多肽蛋白1 | 卷曲螺旋结构域蛋白56抗体 |
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2重组兔单克隆 | Recombinant Bovine TNFASMYD1蛋白抗体 |
JM109细菌 | G蛋白β4抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基4 |
关键字: TNFA;17.4 KDa; 78-234;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。