重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Decorin属于富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖(SLRP)家族,在细胞外基质中发挥关键的调控作用。它最经典的功能是通过与I型、II型及III型胶原蛋白相互作用,调节胶原原纤维的形成与组织结构,从而维持结缔组织的完整性。此外,Decorin还具有抑制血管生成、诱导肿瘤细胞自噬与线粒体自噬、以及通过结合并抑制TGF-β等生长因子来调节细胞信号传导的多重功能。该重组蛋白纯度高(>95%),以冻干粉形式提供,广泛应用于纤维化疾病、肿瘤生物学、伤口愈合及组织工程等领域的机制研究。
产品名称; Recombinant Mouse Decorin
别名; Bone proteoglycan II, CSCD, DCN, DCN protein, Decorin, Decorin proteoglycan, Dermatan sulphate proteoglycans II, DKFZp686J19238, DSPG 2, DSPG2, PG 40, PG II, PG S2, PG-S2, PG40, PGII, PGS 2, PGS2, PGS2_HUMAN, Proteoglycan core protein, SLRR1B, Small leucine rich protein 1B
宿主; E.Coli
表达区间; 35-354
分子量; 35.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
丝裂原活化蛋白激酶MKK6 | 细菌β-内酰胺酶报告基因活性生物发光法定量酶联免疫试剂盒 |
颗粒酶A | ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
化妆品乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 冰冻切片组织PARP蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织GRK4激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | GST融合蛋白因子10α(FACTOR Xa)酶切试剂盒 |
动物源性食品火鸡源基因pcr检测试剂盒 | 磷酸肌醇结合蛋白1抗体 |
富含半胱氨酸运动神经元蛋白1 | G蛋白结合蛋白α13/Gα13抗体 |
细胞总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量pcr检测试剂盒 | 细胞基质金属(MMP-9)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
咖啡糖精(saccharin)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 组织总抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量pcr检测试剂盒 |
中心体蛋白192 | eIF2Bδ蛋白抗体 |
回肠绒毛刷状缘膜蛋白 | 猫眼综合征染色体候选基因6抗体 |
p21激活激酶4 | 蛋白激酶C zeta 抗体 |
磷脂酰肌醇激酶单克隆 | Recombinant Mouse Decorin载脂蛋白D抗体 |
链霉菌属基因组DNA纯化试剂盒 | Bcl2 beta蛋白抗体 |
关键字: Decorin;35.1 kDa; 35-354;
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