重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
作为线粒体内的关键调节蛋白,Frataxin的核心功能是参与铁硫簇(Fe-S clusters)的组装与生物合成,并调节线粒体内的铁稳态,防止铁介导的氧化应激损伤。其功能缺失是导致弗里德赖希共济失调(一种常染色体隐性遗传的神经退行性疾病)的根本原因,会导致线粒体铁蓄积、氧化磷酸化酶缺陷及细胞死亡。重组小鼠Frataxin是研究线粒体疾病机制、筛选FRDA治疗药物及开发相关诊断检测方法(如ELISA标准品)的重要分子工具。
产品名称; Recombinant Mouse Frataxin
别名; CyaY, d-FXN, FA, FARR, Frataxin mature form, Frataxin(81-210), FRDA, FRDA_HUMAN, Friedreich ataxia protein, Fxn, i-FXN, m56-FXN, m78-FXN, m81-FXN, MGC57199, X25
宿主; E.Coli
表达区间; 78-207
分子量; 14.2 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
微管相关丝氨酸/苏氨酸激酶4 | 食物辅酶Q含量比色法定量酶联免疫试剂盒 |
FAM116A蛋白 | 冰冻切片切片组织真菌高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒 |
植物麦芽糖含量酶连续反应光谱法定量pcr检测试剂盒 | BAX蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
动物细胞醛酮还原酶1D(aldo-keto reductase 1D)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞D-乳酸比色法定量酶联免疫试剂盒 |
组织PKD2激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 癌/睾丸抗原抗体86抗体 |
睾丸特异性DMRT3蛋白 | 凋亡加强结构域蛋白8抗体 |
无激素胎牛血清(活性碳/葡聚糖处理) | 冰冻切片网硬蛋白(RETICULIN)染色试剂盒 |
通用型HRP-DAB底物显色试剂盒 | 血液磷酸二酯酶4(PDE4)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
组蛋白去乙酰化酶3 | 乙醇脱氢酶5抗体 |
活化转录因子1 | APC标记人CD95单克隆抗体 |
RABEP1蛋白 | 磷酸化Nemo样激酶抗体 |
AF750标记的即刻早期应答基因2蛋白 | Recombinant Mouse Frataxinγ氨基丁酸运载蛋白2抗体 |
AF750标记的甲状腺过氧化物酶抗体 | IRGQ蛋白抗体 |
关键字: Frataxin;14.2 kDa; 78-207;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。