重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
GDF-5在骨骼和关节的发育、软骨形成及内环境稳态维持中发挥至关重要的作用。它通过与BMPR-IB、BMPR-II等受体结合,激活下游Smad 1/5/8及MAPK等信号通路,促进软骨细胞的增殖、分化及细胞外基质(ECM)的合成。此外,研究表明GDF-5在运动诱导的心肌血管新生、骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成软骨分化及软骨缺损修复中也具有显著的生物学活性。重组小鼠GDF-5蛋白主要用于骨关节发育、软骨组织工程及退行性关节疾病等领域的基础科学研究。
产品名称; Recombinant Mouse GDF 5
别名; BMP14, Cartilage derived morphogenetic protein 1, Cartilage-derived morphogenetic protein 1, CDMP-1, CDMP1, GDF-5, Gdf5, GDF5_HUMAN, Growth differentiation factor 5, Growth/differentiation factor 5, LAP4, OS5, Radotermin, SYNS2
宿主; E.Coli
表达区间; 376-495
分子量; 13.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
微管相关蛋白EB家族3 | 细胞科萨基病毒A(Coxsackievirus A)定量PCR扩增酶联免疫试剂盒 |
磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白 | 酵母钾离子(K)浓度化学比色法定量酶联免疫试剂盒 |
动物糖蛋白化学法完全糖基分解试剂盒 | 载玻片细胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达NBT显色光学显微镜酶联免疫试剂盒 |
细胞组蛋白脱乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞a-(a-AMYLASE)活性比色法定量酶联免疫试剂盒 |
蜂蜜比色法定量pcr检测试剂盒 | THUMPD1蛋白抗体 |
富含亮氨酸重复结构域蛋白10 | 促代谢型谷氨酸受体2+4抗体 |
细胞内氧化应激活性氧(ROS)初级绿色荧光测定试剂盒 | 组织胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
化妆品乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色谱法定量pcr检测试剂盒 | 细胞肌酸激酶同工酶脑型(CK--BB)活性酶连续循环比色法定量pcr检测试剂盒 |
肿瘤/睾丸抗原81 | 隐花色素蛋白1抗体 |
霍乱肠毒素β链 | 9号染色体开放阅读框16抗体 |
Pacific Blue标记人CD127 (IL7R)单克隆 | 颗粒酶K抗体 |
配对盒基因8重组兔单克隆 | Recombinant Mouse GDF 5TGF-β诱导早期应答基因1抗体 |
羟类固醇脱氢酶17β-HSD重组兔单克隆抗体 | KIAA1549蛋白抗体 |
关键字: GDF 5;13.1 kDa; 376-495;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。