重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
HPD是酪氨酸分解代谢途径中的关键限速酶,其经典核心功能是催化4-羟基苯基丙酮酸(4-HPP)转化为尿黑酸(Homogentisic acid),该反应涉及苯环的羟基化与侧链的重排。其活性依赖于亚铁离子(Fe²⁺)和分子氧,并需要抗坏血酸作为辅助因子以维持铁离子的还原态。在临床上,HPD的异常与遗传性酪氨酸血症(特别是III型)及卟啉病的发病机制密切相关。值得注意的是,最新的研究表明,HPD还具有非经典的“兼职”功能(Moonlighting function),它可作为一种RNA结合蛋白(RBP),直接
产品名 | Recombinant Mouse HPD | 分子量 | 43.1 kDa |
表达区间 | 1-393 | 货号 | XG-DB4014 |
别名
4 HPPD, 4 hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, 4 hydroxyphenylpyruvic acid oxidase, 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, 4-hydroxyphenylpyruvic acid oxidase, 4HPPD, GLOD3, glyoxalase domain containing 3, HPD, HPPD_HUMAN, HPPDase, PPD
宿主; E.Coli
表达区间; 1-393
分子量; 43.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于?~13.4 kDa?处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
吞噬刺激肽 | 葡萄糖一6一磷酸脱氢酶(G6PD)定量酶联免疫试剂盒 |
Fas相关磷酸酶1 | 细胞P35蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
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体液基质金属(MMP-13)活性比色法定量pcr检测试剂盒 | 脑钙粘蛋白12抗体 |
谷氨酸受体KA1 | Ki67蛋白抗体 |
冰冻切片组织BCL2蛋白表达荧光显微镜pcr检测试剂盒 | 细胞基质金属(MMP-12)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
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转铁蛋白受体2 | FAM200A蛋白抗体 |
肌动蛋白α/α-SMA/α Actin单克隆 | 囊泡谷氨酸转运蛋白3抗体 |
PPEF1蛋白 | 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M5抗体 |
NE高效液相色谱电化学定量pcr检测试剂盒 | Recombinant Mouse HPD异质核糖核蛋白H抗体 |
HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒 | APC-Cy7标记小鼠CD4单克隆抗体 |
关键字: HPD;43.1 kDa; 1-393;
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