黑白轮枝孢

产品名称：黑白轮枝孢

英文名：Verticillium albo-atrum

规格：冻干粉；斜面；菌液；平板

货号：PJZ1051

作用：棉花黄萎病菌(测定用)

形态：蔓延生长，形状不规则，边缘不规则，不透明，淡粉色，反面黄色，浅色，表面粗糙，质地干燥

基本信息：

培养基  马铃薯浸粉：6.0，葡萄糖：20.0，琼脂：20.0，pH5.6±0.2（25℃）

生长条件  28℃；3-5天；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  蔓延生长，形状不规则，边缘不规则，不透明，淡粉色，反面黄色，浅色，表面粗糙，质地干燥

模式菌株  no

操作步骤  ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  棉花黄萎病菌(测定用)

共享方式  公益性共享

产品描述：

黑白轮枝孢（Verticillium albo - atrum）是轮枝孢属的丝状真菌，属于半知菌亚门，是多种植物黄萎病的病原菌，主要危害棉花、茄子、番茄等作物。病菌以菌丝体和微菌核在土壤及病残体中越冬，通过土壤和水流传播，感染植物维管束，阻塞导管，影响水分和养分运输，导致植物叶片变黄、枯萎，严重时可造成植株死亡；防治需采取选用抗病品种、合理轮作、土壤消毒及化学药剂防治等综合措施。

菌种保存:

低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。

保藏方法大致可分为以下几种：

1．传代培养 保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌 用），培养后于4—6℃冰箱内保存。

2．液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3．载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5．冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。

有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

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菌种活化与培养:

菌种活化

从冻存管或斜面培养基中取出菌种，接种至新鲜培养基中

在适宜条件下（如37°C，摇床培养）进行预培养，使菌种恢复活性。

扩大培养

将活化后的菌液按一定比例接种至新鲜培养基中。

控制培养条件（温度、转速、通气量等），确保菌体生长处于对数期。

菌液浓度测定

使用分光光度计测定OD600值，评估菌液浓度。

根据实验需求调整菌液浓度。