人肝星状细胞
产品信息：
英文名称 | Human Hepatic Stellate Cells | 种属 | 人 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1300 |
组织来源 | 肝脏组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介：
人肝星形分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝星形细胞（HSC）又名肝贮脂细胞、贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等，是肝脏细胞外基质的主要来源。HSC在激活后可进一步转化为肌成纤维细胞样细胞，各种可导致肝纤维化的因素均将HSC作为终靶细胞。正常情况下，HSC处于静止状态，当肝脏发生炎症反应或受到机械刺激等损伤时，HSC的表型由静止型转变为激活型，激活的HSC可通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成及肝内结构的重建，此过程也是肝纤维化的中心环节。肝星形细胞分布于肝脏的Disse间隙内，是合成、分泌细胞外基质的主要来源，在肝纤维化的发生中处于重要地位。肝星形细胞是肝脏的间充质细胞，约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群，肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分，合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构，还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。此外，肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。
方法简介 公司实验室分离的人肝星形采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人肝星状经α-SMA、Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
公司正在出售的产品：
人对氨基苯甲酸(PABA)PCR检测试剂盒 | TMPRSS11A 跨膜丝氨酸蛋白酶11a抗体 |
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)PCR检测试剂盒 | 线粒体内膜转位同源蛋白9抗体 |
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大鼠胱抑素S(CST4)PCR检测试剂盒免费代测 | PirA 杆菌PirA抗体 |
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异质核糖核蛋白hnRNPA2抗体 | 鸡α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)核酸检测试剂盒 |
MeV H 麻疹病毒血凝素抗体 | 小鼠平滑肌肌动蛋白α2(ACTα2)PCR检测试剂盒 |
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人外周血巨噬细胞 | 人肝星状细胞Human Lymph Node Fibroblast Cells |
兔神经胶质细胞 | Rabbit microglia cells |
细胞培养操作
消化培养法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm³），以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10⁵ cells/mL）。
将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中静置培养。
关键字： 人肝星状细胞;肝脏组织;贴壁;
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