人主动脉平滑肌细胞
产品信息:

英文名称 | Human Aortic Smooth Muscle Cells | 种属 | 人 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1275 |
组织来源 | 主动脉组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:

人主动脉平滑肌分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介 公司实验室分离的人主动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人主动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
关键操作技巧与注意事项:

成功的原代培养依赖于严谨的细节控制:
严格无菌操作:这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行,试剂和耗材必须无菌。
保持静置:细胞接种后的最初24-48小时内,应保持培养瓶绝对静置,避免频繁取出观察或晃动,这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程:
消化时间要恰到好处,过长会损伤细胞,过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小,常用于分离活性要求高的细胞;胰蛋白酶作用较强,需严格控制时间。
酶液应新鲜配制,避免活性下降。
控制接种密度:原代细胞在低密度下不易存活,建议适当提高初始接种密度,以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液:根据培养基颜色变化(如变黄)或每隔2-3天更换一次培养液,以清除代谢废物并补充营养。
公司正在出售的产品:

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小鼠谷胱甘肽S转移酶α4(GSTα4)PCR检测试剂盒 | 6号染色体开放阅读框223抗体 |
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无蛋白封闭液500ml | 胎盘蛋白6抗体 |
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人角膜上皮细胞 | 人主动脉平滑肌细胞Human Lens Epithelial Cells |
兔脑血管周细胞 | Rabbit bone marrow mast cells |
细胞培养操作

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm³),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10⁵ cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中静置培养。
关键字: 人主动脉平滑肌细胞;主动脉组织;贴壁;
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