产品介绍:

大鼠绒毛膜促性腺激素(HCG)ELISA试剂盒主要用于定量检测大鼠血清、血浆或其他生物液体样本中的HCG含量,是一种双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)科研工具。
产品名称 | 大鼠绒毛膜促性腺激素(HCG)elisa试剂盒 | 英文名称 | RatHCG ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129682 |

检测原理

1.1. 微孔板预包被抗大鼠HCG抗体,样本中的HCG与抗体结合。
1.2. 加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素,形成夹心复合物。
1.3. 加入TMB显色液,HRP催化TMB产生蓝色产物,终止反应后变为黄色,颜色深浅与HCG浓度成正比。
1.4. 用酶标仪在450nm波长测定吸光度,通过标准曲线计算样品浓度。
2. 主要组成

2.1. 预包被抗体微孔板
2.2. HCG标准品
2.3. 生物素化检测抗体
2.4. HRP-链霉亲和素
2.5. TMB显色液
2.6. 终止液
2.7. 洗涤缓冲液
2.8. 样品稀释液
3. 样本处理与保存
3.1. 血清/血浆/组织匀浆/细胞上清:按说明书离心取上清,避免溶血和高血脂;样本可分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
3.2. 保存条件:试剂盒2-8℃冷藏保存,标准品-20℃保存,有效期约6个月。
4. 试剂盒特点

4.1. 灵敏度高:最低检测限可达1.875 mU/mL(不同品牌有所差异)。
4.2. 特异性强:不与大鼠其他激素交叉反应。
4.3. 重复性好:板内和板间变异系数均小于10-15%。
4.4. 适用样本类型广:血清、血浆、组织、细胞等多种生物液体。
5. 注意事项
5.1. 严格按说明书操作,避免试剂和样本污染。
5.2. 洗涤要充分,避免非特异性吸附。
5.3. 标本溶血会影响检测结果,应避免。
5.4. 不用于临床诊断,仅用于科研。
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
注意事项

避免样本溶血和反复冻融,样本如不能立即检测建议分装-20℃保存
试剂盒仅供科研使用,不用于临床诊断
不同批号试剂不可混用,所有试剂使用前需摇匀
洗涤过程需彻底,避免交叉污染和板内干燥
显色底物TMB需避光保存,使用前配制
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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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