大鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒
产品简介:
大鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其他生物体液中嗜铬粒蛋白A(CHGA)含量的科研工具，采用双抗体夹心法ELISA原理。
英文名称 | Rat CHGA ELISA Kit | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A116470 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 78.125pg/mL | 检测范围 | 156.25pg/mL-5000pg/mL |
检测原理
预先将抗大鼠CHGA抗体包被在酶标板上；
加入待测样本或标准品，样本中的CHGA与包被抗体结合；
加入生物素标记的抗大鼠CHGA抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物；
洗涤后加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；
加入显色底物TMB，HRP催化TMB显色，颜色深浅与CHGA浓度正相关；
在450 nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样本中CHGA的浓度。
2. 主要性能参数
检测范围：通常为31.25-2000 pg/mL，不同品牌有所差异
灵敏度：最低检测限可达12.3-18.75 pg/mL
特异性：仅针对大鼠CHGA，与其他类似物无明显交叉反应
精密度：板内和板间变异系数一般<10%～12%
样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆、细胞上清、尿液等
保存条件：2-8℃冷藏保存，避免反复冻融，试剂盒有效期约6个月
3. 操作步骤（简要）
从冷藏环境中取出试剂盒，平衡至室温；
设置标准品孔和样本孔，加入相应试剂；
37℃温育1～2小时，使抗原抗体充分结合；
洗涤酶标板3～5次，去除未结合物质；
加入酶标检测抗体，37℃再温育1小时；
洗涤后加TMB显色，室温或37℃避光反应10-15分钟；
加终止液，使颜色稳定，酶标仪450 nm读数；
绘制标准曲线，计算样本浓度。
4. 注意事项
避免样本溶血和反复冻融，样本如不能立即检测可分装-20℃保存；
不同批次试剂盒组分不可混用，所有试剂使用前需摇匀；
试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断；
洗板过程需彻底，避免板内污染或干燥；
显色底物TMB需避光保存，使用前30分钟配制。
应用与服务
该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。
操作要点：
需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。
洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。
所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。
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