产品介绍：
大鼠Antithrombin Ⅲ ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中抗凝血酶Ⅲ（Antithrombin Ⅲ，AT III）含量的科研产品，基于双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理设计，具有高灵敏度和高特异性。
产品名称 | 大鼠Antithrombin Ⅲelisa试剂盒 | 英文名称 | RatAntithrombin Ⅲ ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129766 |
核心原理
微孔板预先包被抗大鼠AT III特异性抗体，样本中的AT III与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体和HRP标记链霉亲和素，形成免疫复合物。
洗涤后加入TMB显色底物，颜色深浅与AT III浓度成正相关。
450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样品中AT III浓度。
主要特点
检测范围宽，灵敏度高：最低检测限可达0.1 ng/mL，线性范围覆盖生理及病理浓度。
高特异性：不与大鼠其他凝血因子（如蛋白C/S）发生交叉反应。
重复性好：板内和板间变异系数低，结果稳定可靠。
应用领域广：适用于血栓与出血疾病研究、肝衰竭模型、药物评价（如肝素疗效监测）、炎症和内皮功能障碍等基础研究。
操作流程简要
样本准备：血浆（推荐枸橼酸钠抗凝）、血清或组织匀浆，避免使用肝素抗凝样本（可能干扰结果）。
加样：分别加入标准品和待测样本，设空白对照孔。
温育：37℃孵育1小时。
洗板：弃去液体，洗涤3-5次。
加检测抗体：生物素标记二抗+链霉亲和素-HRP，37℃孵育适当时间。
洗板：同上。
显色与终止：加入TMB底物，反应后加入终止液。
读数：450nm测定OD值，依据标准曲线计算浓度。
注意事项
样本需离心（3000 rpm, 10分钟）去除血小板，避免反复冻融。
标准品建议做复孔，R2值需≥0.9以保证标准曲线准确。
溶血、高脂血症样本可能干扰结果，需额外验证。
试剂盒未开封建议4℃保存，标准品-20℃冻存。
ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字： 大鼠;Antithrombin Ⅲ;ELISA试剂盒;
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