产品介绍：
大鼠Apolipo protein ELISA试剂盒是专用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中载脂蛋白（Apolipoprotein, Apo）含量的试剂盒，仅限科研使用，不用于临床诊断。
产品名称 | 大鼠Apolipo proteinelisa试剂盒 | 英文名称 | RatApolipo protein ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129817 |
检测原理
采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。用抗大鼠载脂蛋白特异性抗体预包被酶标板，样本中的载脂蛋白与抗体结合后，加入生物素化检测抗体和酶标二抗，形成免疫复合物。洗涤后加入TMB显色底物，辣根过氧化物酶催化显色，颜色深浅与载脂蛋白浓度呈正相关。终止反应后，用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样品浓度。
主要组成
预包被抗体的酶标板
载脂蛋白标准品
生物素化检测抗体
酶标二抗（如HRP-链霉亲和素）
显色底物（TMB）
终止液
洗涤液
样品稀释液
密封膜/封板膜
样本类型
血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆（如肝脏）、细胞培养上清液等
性能参数
检测范围：如5–500 ng/mL（不同亚型和品牌有差异）
灵敏度：最低检测限1–10 ng/mL
特异性：仅识别大鼠载脂蛋白，避免与其他物种交叉反应
重复性：板内和板间变异系数通常小于10%
回收率：≥90%1
保存与有效期
试剂盒2–8 ℃冷藏保存，有效期6个月至1年，具体以产品批次和品牌为准。
操作要点
样本和试剂平衡至室温后使用
洗涤液现用现稀释，充分洗涤酶标板
显色时间和温度需严格控制
建议所有样本和标准品做复孔
不同批号试剂勿混用
防止交叉污染和样本反复冻融
ELISA试剂盒的主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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