产品介绍:

大鼠CCL13/MCP-4 ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中CCL13/MCP-4(趋化因子配体13/单核细胞趋化蛋白4)含量设计的科研产品,采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),具备高灵敏度和高特异性。
产品名称 | 大鼠CCL13/MCP-4elisa试剂盒 | 英文名称 | RatCCL13/MCP-4 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129837 |

核心原理
微孔板预先包被抗大鼠CCL13/MCP-4特异性抗体,样本中的CCL13/MCP-4与抗体结合后,加入生物素标记的检测抗体和HRP标记链霉亲和素,形成免疫复合物。
洗涤后加入TMB显色底物,颜色深浅与CCL13/MCP-4浓度成正相关。
450nm波长下测定OD值,通过标准曲线计算样品中CCL13/MCP-4浓度。
主要特点

检测范围宽:可检测15.6–1000 pg/mL,灵敏度可达5–10 pg/m。
高特异性:不与大鼠CCL2/MCP-1、CCL8/MCP-2等趋化因子交叉反应,准确检测目标蛋白。
重复性好:板内、板间变异系数均小于15%,结果稳定可靠。
应用领域广:适用于炎症、过敏性疾病、肿瘤微环境、免疫调节等基础研究领域。
操作流程简要

样本准备:血清、血浆(EDTA抗凝)、组织匀浆或细胞培养上清,避免反复冻融。
加样:分别加入标准品和待测样本,设空白对照孔。
温育:37℃孵育30–90分钟。
洗板:弃去液体,洗涤5次。
加检测抗体:生物素化抗体,37℃孵育60分钟。
洗板:同上。
显色与终止:TMB显色,加终止液。
读数:450nm测定OD值,依据标准曲线计算浓度。
注意事项
样本收集后如不立即检测,建议分装保存于-20℃,避免反复冻融。
试剂盒组分需按说明书规范保存,标准品建议-20℃分装冻存。
严格遵守操作步骤及仪器校准,确保结果准确。
ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 大鼠;CCL13/MCP-4;ELISA试剂盒;
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