大鼠Endothelin-1elisa试剂盒
产品简介:
大鼠Endothelin-1 ELISA试剂盒是一种专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中内皮素-1(Endothelin-1, ET-1)含量而设计的科研产品。ET-1是一种由血管内皮细胞分泌的强效血管收缩肽,参与高血压、肺动脉高压、器官纤维化等疾病的发生发展,是心血管和代谢疾病研究的重要靶点。
英文名称 | RatEndothelin-1 ELISA Kit | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129775 | 规格 | 48T/96T |

核心特点
检测原理:采用双抗体夹心ELISA法,酶标板预包被抗大鼠ET-1抗体,样本中的ET-1与抗体结合后,加入生物素标记的检测抗体和酶标链霉亲和素,形成免疫复合物,通过显色反应定量分析。
检测范围与灵敏度:检测范围一般为1.25-80 pg/ml,灵敏度可达0.75 pg/ml(不同品牌有所差异)。
样本类型:兼容血清、血浆(EDTA/肝素)、组织匀浆、细胞上清、尿液、脑脊液等。
试剂盒规格:常见为48T和96T,可分次使用,板条可拆卸。
保存条件:2-8℃冷藏保存,标准品建议-80℃或-20℃分装冻存,避免反复冻融。
检测波长:酶标仪450 nm。
操作流程简述
样本与标准品准备:样本需平衡至室温,标准品用专用稀释液梯度稀释。
加样孵育:将标准品和样本加入对应孔板,37℃孵育1-2小时。
洗涤:弃去孔内液体,洗板3-5次。
检测抗体和酶结合物孵育:加入生物素标记抗体和酶标二抗,孵育、洗涤。
显色与终止:加入TMB显色液,避光显色,最后加入终止液。
读数分析:酶标仪450 nm测定OD值,依据标准曲线计算ET-1浓度。
应用与意义
心血管疾病研究:ET-1是血管收缩和血压调节的关键因子,用于高血压、肺动脉高压、心力衰竭等疾病机制研究。
器官纤维化研究:参与肝、肾等器官的纤维化过程,与TGF-β信号通路协同作用。
药物开发:用于内皮素受体拮抗剂(如波生坦)疗效评估及新药筛选。
注意事项
仅用于科研,不可用于临床诊断。
避免样本溶血和反复冻融,严格按照说明书操作。
每次实验建议设标准曲线和复孔,保证数据准确性。
应用与服务
该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域,如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持,方便用户获得准确可靠的实验结果。
操作要点:
需严格遵守试剂盒说明书操作,建议做复孔及标准曲线。
洗涤过程至关重要,洗涤不充分会影响结果准确性。
所有试剂使用前需恢复至室温,避免批号混用。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
注意事项
试剂盒组分应按说明储存,使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染,建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用,不可用于临床诊断。
显色液需避光保存,终止液为2M硫酸,操作时需安全防护。
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