大鼠Free Soluble RANKLelisa试剂盒
产品简介:
大鼠Free Soluble RANKL ELISA试剂盒是一种专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清等样本中游离可溶性核因子κB受体活化因子配体(Free Soluble RANKL, sRANKL)浓度而设计的科研产品。该试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA),具有高灵敏度和特异性,仅识别大鼠游离形式的sRANKL,不检测膜结合型RANKL(mRANKL),适用于骨代谢、免疫调节及肿瘤骨转移等领域的研究。
英文名称 | RatFree Soluble RANKL ELISA Kit | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129830 | 规格 | 48T/96T |

核心特点
检测原理:微孔板预包被抗大鼠sRANKL抗体,样本中的sRANKL与抗体结合后,加入生物素标记的检测抗体和酶标链霉亲和素,形成免疫复合物,通过显色反应定量分析。
检测范围:典型检测范围为0-24 ng/mL,灵敏度可达0.1 ng/mL(不同品牌有所差异)。
样本类型:兼容血清、血浆(EDTA/肝素)、组织匀浆、骨髓上清、破骨细胞培养液等。
试剂盒规格:常见为48T和96T,可分次使用。
保存条件:2-8℃冷藏保存,标准品建议-80℃或-20℃分装冻存,避免反复冻融。
检测波长:酶标仪450 nm。
操作流程简述
样本与标准品准备:样本需平衡至室温,标准品用专用稀释液梯度稀释。
加样孵育:将标准品和样本加入对应孔板,37℃孵育1-2小时。
洗涤:弃去孔内液体,洗板3-5次。
检测抗体和酶结合物孵育:加入生物素标记抗体和酶标二抗,孵育、洗涤。
显色与终止:加入TMB显色液,避光显色,最后加入终止液。
读数分析:酶标仪450 nm测定OD值,依据标准曲线计算sRANKL浓度。
应用与意义
骨代谢疾病研究:如骨质疏松、关节炎、肿瘤骨转移等疾病模型,sRANKL水平与骨吸收、破坏程度密切相关。
免疫调节研究:树突状细胞、T细胞等免疫细胞通过sRANKL-RANK信号通路参与免疫调节。
药物开发:用于评估药物对骨代谢及免疫微环境的影响。
注意事项
仅用于科研,不可用于临床诊断。
避免样本溶血和反复冻融,严格按照说明书操作。
每次实验建议设标准曲线和复孔,保证数据准确性。
应用与服务
该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域,如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持,方便用户获得准确可靠的实验结果。
操作要点:
需严格遵守试剂盒说明书操作,建议做复孔及标准曲线。
洗涤过程至关重要,洗涤不充分会影响结果准确性。
所有试剂使用前需恢复至室温,避免批号混用。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
注意事项
试剂盒组分应按说明储存,使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染,建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用,不可用于临床诊断。
显色液需避光保存,终止液为2M硫酸,操作时需安全防护。
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