人Vitamin D binding proteinelisa试剂盒
产品简介:
人维生素D结合蛋白（Vitamin D Binding Protein, DBP）ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆等）中的DBP水平。DBP是一种多功能糖蛋白，主要由肝脏合成，负责运输维生素D及其代谢物（如25-羟基维生素D和1,25-二羟基维生素D），在维持钙磷代谢、骨骼健康及免疫调节中发挥重要作用。
英文名称 | Human Vitamin D binding protein ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A129708 | 规格 | 48T/96T |
检测原理
双抗体夹心法ELISA：微孔板预包被抗人DBP抗体，样本中的DBP与生物素标记的检测抗体结合，再与HRP标记的链霉亲和素反应，加入TMB底物后显色，颜色深浅与DBP浓度呈正相关，酶标仪在450 nm波长处读数。
主要组成
预包被酶标板（96/48孔）
DBP标准品（多个浓度梯度）
生物素化检测抗体
HRP标记链霉亲和素
底物溶液（TMB）、终止液（硫酸）
洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂
检测流程
加样：标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素
洗涤：每孔加满洗涤液，重复5次
显色：加入底物溶液，避光反应10-15分钟
终止：加入终止液
读数：酶标仪450 nm波长测定OD值
性能指标
检测范围：通常为0.3125-20 ng/mL（具体以说明书为准）
灵敏度：最小可检测浓度小于0.078 ng/mL
特异性：仅与人类DBP反应，不与其他蛋白显著交叉反应
重复性：板内变异系数≤10%，板间变异系数≤15%
临床与研究意义
维生素D代谢研究：DBP水平影响维生素D的转运和生物利用度，检测DBP有助于评估维生素D缺乏或过量的机制。
肾脏疾病研究：DBP在肾小球滤过和肾小管重吸收中发挥作用，尿液中DBP水平变化可反映肾小管损伤（如IgA肾病）
免疫相关疾病研究：DBP参与免疫调节，其水平变化与系统性红斑狼疮、糖尿病等疾病相关，检测DBP可为疾病机制研究提供线索。
样本要求
血清/血浆：避免溶血和反复冻融。
其他样本：如细胞培养上清、组织匀浆，需经适当处理和稀释。
注意事项
试剂盒需2-8℃保存，有效期一般为6个月。
实验前平衡至室温，严格按照说明书操作。
建议设空白对照、标准曲线和样本复孔，确保结果准确可靠。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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