兔E-cadherin/CD324/CDHelisa试剂盒
产品简介:
兔E-cadherin/CD324/CDH ELISA试剂盒是专为定量检测兔样本(如血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等)中E-cadherin(CD324/CDH1)蛋白含量而设计的试剂盒。E-cadherin是一种钙依赖型细胞粘附分子,主要参与细胞间粘附及组织结构维持,其表达异常与肿瘤发生、转移及预后密切相关。
英文名称 | Rabbit E-cadherin/CD324/CDH ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A129949 | 规格 | 48T/96T |
检测原理
采用双抗体夹心ELISA法:酶标板上预包被抗兔E-cadherin特异性抗体,样本中的E-cadherin与抗体结合后,加入酶标二抗,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物,通过底物显色,颜色深浅与E-cadherin浓度成正比。

试剂盒组成(典型)
预包被E-cadherin抗体的酶标板
E-cadherin标准品
酶标抗体(如HRP标记)
样本稀释液
洗涤液
显色底物(TMB)
终止液
操作步骤
样本准备:按需做复孔,样本建议提前平衡至室温。
加样:加入标准品和待测样本,37℃孵育1-2小时。
洗涤:洗板3-5次,去除未结合物质。
加酶标二抗:37℃孵育45-60分钟。
显色与终止:加入底物避光反应,终止液终止反应。
读数:酶标仪450 nm测定吸光度,依据标准曲线计算E-cadherin浓度。
注意事项
严格按说明书操作,避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融,未用完的板条密封冷藏(2-8℃)。
试剂盒不同批号组分不可混用,标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理,避免溶血和杂质干扰。
应用领域
用于兔肿瘤、炎症、组织损伤修复等疾病机制研究。
支持细胞生物学、病理学及免疫学等多领域科研实验。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
关键字: 兔; E-cadherin/CD324/CD;ELISA试剂盒;
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