兔Fas/TNFRSF6elisa试剂盒
产品简介:
英文名称 | Rabbit Fas/TNFRSF6 ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A129990 | 规格 | 48T/96T |
兔Fas/TNFRSF6 ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清液等样本中Fas蛋白（又称CD95或TNFRSF6）的含量。Fas是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族，主要参与细胞凋亡信号传导，在免疫调节、肿瘤发生及自身免疫病中发挥重要作用。
检测原理
采用双抗体夹心ELISA法：酶标板上预包被抗兔Fas特异性抗体，样本中的Fas与抗体结合后，加入酶标二抗，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物，催化底物显色，颜色深浅与Fas浓度成正比。
试剂盒组成（典型）
预包被Fas抗体的酶标板
Fas标准品
酶标抗体（如HRP标记）
样本稀释液
洗涤液
显色底物（TMB）
终止液
操作步骤
样本准备：血清、血浆或细胞上清液等，建议做复孔，样本需平衡至室温。
加样：加入标准品和待测样本，37℃孵育1-2小时。
洗涤：洗板3-5次，去除未结合物质。
加酶标二抗：37℃孵育45-60分钟。
显色与终止：加入底物避光反应，终止液终止反应。
读数：酶标仪450 nm测定吸光度，根据标准曲线计算Fas浓度。
注意事项
严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）。
试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
关键字： 兔;Fas/TNFRSF6;ELISA试剂盒;
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