产品介绍:

兔Glucagon ELISA试剂盒是专为定量检测兔血清、血浆、组织匀浆或细胞上清液等样本中胰高血糖素(Glucagon)含量而设计的科研工具。该试剂盒采用竞争性ELISA或双抗体夹心法ELISA原理,具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性,广泛应用于糖尿病、肥胖及代谢综合征等代谢类疾病的研究。
产品名称 | 兔Glucagonelisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit Glucagon ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129996 |
英文名称:Rabbit Glucagon ELISA Kit
检测样本类型:血清、血浆(EDTA/柠檬酸盐/肝素)、组织匀浆、细胞上清液等
规格:96T/48T(可检测约90或46个样本,含标准品孔)
保存条件:2–8℃冷藏,避光保存
有效期:6个月

检测原理

采用竞争性ELISA法或双抗体夹心法:
酶标板预先包被抗兔Glucagon特异性抗体;
加入待测样本或标准品,样本中的Glucagon与抗体结合;
洗涤后加入酶标检测抗体,形成免疫复合物;
显色反应后,酶标仪450nm测定吸光度,根据标准曲线计算Glucagon浓度。
主要组成

组分 规格(96T) 说明
预包被酶标板 1块(96孔) 抗体包被,即用型
标准品 6瓶(冻干品) 用于标准曲线
酶标抗体 1瓶(120μL) HRP标记,需稀释
样本稀释液 1×20ml 即用型
洗涤缓冲液 1×20ml(浓缩) 使用前稀释25倍
底物A、B 各10ml 避光保存,现配现用
终止液 1×10ml 强酸,小心操作
封板膜 1张 一次性使用,防污染
样本处理
血清/血浆/组织匀浆/细胞上清:采集后1000×g离心10–20分钟,取上清立即检测或–70℃保存,避免反复冻融。
注意事项:避免溶血与高血脂样本,操作需严格遵循说明书。
性能指标

检测范围:5–414 pg/mL(不同品牌有所差异)
灵敏度:最低可检测1–2.27 pg/mL
特异性:不与GLP-1、GLP-2、Glicentin等交叉反应
重复性:板内变异<10%,板间变异<15%
线性相关性:R2≥0.92
操作要点
所有试剂使用前需平衡至室温(20–25℃);
标准品和样本建议做复孔;
显色反应避光进行,终止后15分钟内读数;
标准曲线采用四参数Logistic回归或线性拟合;
浓度结果如进行了样本稀释,需乘以稀释倍数。
注意事项

仅限科研使用,不得用于临床诊断
不同批次试剂不可混用
洗板要充分,拍干孔内液体
底物和终止液有毒,需戴手套操作
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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