产品介绍:

兔IGFBP-6 ELISA试剂盒是专为定量检测兔血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)含量而设计的试剂盒,采用双抗体夹心法,灵敏度高、特异性强,可满足科研及临床诊断需求。
产品名称 | 兔IGFBP-6elisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit IGFBP-6 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A130010 |
1. 检测原理
微孔板预包被抗兔IGFBP-6抗体,样本中的IGFBP-6与抗体结合后,加入生物素标记的检测抗体和链霉亲和素-酶复合物,形成免疫复合物。加入TMB底物显色,颜色深浅与样本中IGFBP-6浓度成正相关。
2. 主要组成

预包被抗体的微孔板
生物素化抗体
酶结合物
标准品
样品稀释液、抗体稀释液
TMB显色液
终止液
洗涤液

3. 操作步骤

将标准品和待测样本加入微孔,37℃孵育90分钟
洗涤2-5次
加生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟
洗涤3-5次
加酶结合物工作液,37℃孵育30分钟
洗涤5次
加TMB显色液,避光反应10-30分钟
加终止液,酶标仪450nm读数
4. 样本处理与保存

血清、血浆、组织匀浆、细胞上清均可检测
避免反复冻融,分装后-20℃或-70℃保存
试剂盒2-8℃保存,标准品和酶标抗体避免冻融
5. 应用领域
用于兔生长发育、代谢、炎症及肿瘤等研究。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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