产品介绍:

产品名称 | 兔IL-12p40elisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit IL-12p40 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A130065 |
兔IL-12p40 ELISA试剂盒是一种专为定量检测兔血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清液等样本中白介素12 p40(IL-12p40)含量设计的高度特异性试剂盒,广泛应用于免疫学、炎症、肿瘤及感染等疾病相关的科研实验。

1. 检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Sandwich ELISA):
酶标板微孔预先包被抗兔IL-12p40特异性抗体;
样本中的IL-12p40与固相抗体结合,加入酶标记的检测抗体后形成免疫复合物;
加入显色底物(如TMB),酶催化反应使溶液显色,颜色深浅与IL-12p40浓度成正比;
用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样本浓度。
2. 主要组成

预包被微孔板(96孔或48孔)
酶标检测抗体(HRP-抗IL-12p40)
标准品(用于绘制标准曲线)
样品稀释液、洗涤液、底物液、终止液
封板膜、说明书
3. 检测步骤(简要)

将标准品和待测样本加入微孔,37℃孵育1小时;
洗涤微孔板,去除未结合物质;
加入酶标抗体,37℃孵育1小时;
再次洗涤,加入底物液,避光显色;
加终止液,酶标仪读数,依据标准曲线计算样本浓度。
4. 保存与注意事项
试剂盒2-8℃保存,有效期6个月,避免反复冻融和阳光直射;
样本如需长期保存,建议分装后于-20℃或-80℃冷冻;
检测前需将试剂恢复至室温,严格按说明书操作,避免交叉污染。
5. 应用领域

免疫反应与炎症研究
肿瘤机制及感染性疾病相关因子检测
药物开发与疗效评价等领域。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 兔; IL-12p40;ELISA试剂盒;
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