产品介绍:

产品名称 | 兔MMP-7elisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit MMP-7 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129963 |
兔MMP-7 ELISA试剂盒用于定量检测兔血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、唾液等生物样本中的基质金属蛋白酶7(MMP-7)。MMP-7是一种与细胞外基质降解、组织重塑、炎症反应及肿瘤转移等过程密切相关的酶。
检测原理
采用双抗体夹心ABC-ELISA法:用抗兔MMP-7单抗包被酶标板,标准品或样品中的MMP-7与单抗结合,加入生物素化的抗兔MMP-7抗体,再加入辣根过氧化物酶标记的Streptavidin,与生物素结合,最后加入底物显色,颜色深浅与MMP-7浓度成正比。

试剂盒组成

酶标板(抗兔MMP-7单抗包被)
MMP-7标准品
生物素化抗兔MMP-7抗体
酶标抗体工作液(HRP-Streptavidin)
标本稀释液
浓缩洗涤液
底物工作液(TMB)
终止液(硫酸)
操作步骤

样本准备:血清、血浆、细胞培养上清等尽早检测,2-8℃保存(48小时内)或-20℃/-70℃冷冻保存,避免反复冻融。
标准品配制:按说明书稀释标准品,配成系列浓度。
加样:每孔加入标准品或待测样品100μl,37℃反应120分钟。
洗涤:用洗涤液充分洗涤4-6次。
加第一抗体:每孔加入生物素化抗体100μl,37℃反应60分钟。
洗涤:同前。
加酶标抗体:每孔加100μl,37℃反应30分钟。
洗涤:同前。
显色与终止:每孔加入底物工作液100μl,37℃避光反应15分钟,加终止液100μl。
读数:30分钟内450nm测定OD值,通过标准曲线计算MMP-7浓度。
性能特点

灵敏度高:最小检出限小于15 pg/ml
特异性强:可检测重组或天然兔MMP-7,不与其他兔细胞因子交叉反应
重复性好:板内、板间变异系数均<10%
注意事项

建议所有标准品和样本做复孔,每次测定需做标准曲线。
洗涤充分是实验成败关键。
试剂盒组分未使用完需密封保存,标准品复溶后请丢弃,避免反复冻融。
仅限科研使用,不可用于临床诊断。
该试剂盒是研究兔MMP-7表达、功能及调控机制的专用工具,适用于兔相关炎症、肿瘤、组织损伤等领域的科研检测。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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