兔OPGelisa试剂盒
产品简介:
兔OPG ELISA试剂盒是专为定量检测兔血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液等样本中骨保护素(Osteoprotegerin, OPG)含量而设计的科研工具。OPG是一种重要的骨代谢调节因子,参与骨吸收与骨重建过程,在骨质疏松、炎症、心血管疾病及肿瘤骨转移等疾病的研究中具有广泛应用。
英文名称 | Rabbit OPG ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130079 | 规格 | 48T/96T |
英文名称:Rabbit Osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit
检测样本类型:血清、血浆(EDTA/柠檬酸盐/肝素)、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等
规格:96T/48T(可检测约90或46个样本,含标准品孔)
保存条件:2–8℃冷藏,避光保存
有效期:6个月

检测原理
采用双抗体夹心法ELISA:
酶标板预先包被抗兔OPG特异性抗体;
加入待测样本或标准品,样本中的OPG与抗体结合;
洗涤后加入酶标检测抗体,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物;
显色反应后,酶标仪450nm测定吸光度,通过标准曲线计算OPG浓度。
主要组成
组分 规格(96T) 说明
预包被酶标板 1块(96孔) 抗体包被,即用型
标准品 6瓶(冻干品) 用于标准曲线
酶标抗体 1瓶(120μL) HRP标记,需稀释
样本稀释液 1×20ml 即用型
洗涤缓冲液 1×20ml(浓缩) 使用前稀释25倍
底物A、B 各10ml 避光保存,现配现用
终止液 1×10ml 强酸,小心操作
封板膜 1张 一次性使用,防污染
样本处理
血清/血浆/组织匀浆/细胞上清:采集后1000×g离心10–20分钟,取上清立即检测或–70℃保存,避免反复冻融。
注意事项:避免溶血与高血脂样本,严格按照说明书操作。
性能指标
检测范围:0.156–10 ng/mL(不同品牌有所差异)
灵敏度:最低可检测0.057 ng/mL
特异性:仅检测OPG,不与其他细胞因子发生交叉反应
重复性:板内变异<10%,板间变异<15%
线性相关性:R2≥0.92
操作要点
所有试剂使用前需平衡至室温(20–25℃);
标准品和样本建议做复孔;
显色反应避光进行,终止后15分钟内读数;
标准曲线采用四参数Logistic回归或线性拟合;
浓度结果如进行了样本稀释,需乘以稀释倍数。
注意事项
仅限科研使用,不得用于临床诊断
不同批次试剂不可混用
洗板要充分,拍干孔内液体
底物和终止液有毒,需戴手套操作
应用领域
骨代谢与骨质疏松机制研究
炎症及免疫调节相关疾病
心血管疾病与肿瘤骨转移分析
临床前药物开发与评价
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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