兔Periostinelisa试剂盒
产品简介:
英文名称 | Rabbit Periostin ELISA Kit | 产品类别 | Rabbit/兔Elisa试剂盒 |
货号 | A130052 | 规格 | 48T/96T |
试剂盒组成
预包被酶标板：已包被抗Periostin抗体的96孔板。
标准品：不同浓度的Periostin标准品，用于绘制标准曲线。
检测抗体：生物素标记的抗Periostin抗体。
酶结合物：辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。
洗涤液、底物液、终止液：用于洗涤反应板和显色反应。
操作步骤
加样：在酶标板孔中加入标准品或样品。
温育：37℃温育，使Periostin与抗体结合。
洗涤：去除未结合的物质。
加酶结合物：加入酶标抗体，与结合的Periostin形成复合物。
显色：加入底物液，酶催化显色反应。
终止：加入终止液，终止反应。
测定：酶标仪在450nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算浓度。
注意事项
样本处理：避免使用含的样本，以免抑制酶活性。
试剂保存：标准品需-20℃保存，其他试剂4℃保存。
操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染。
选择试剂盒的考虑因素
灵敏度和特异性：选择经验证的高灵敏度和特异性试剂盒。
种属适用性：确保试剂盒适用于兔样本。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”？
A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗？
A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？
A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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