串珠镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 串珠镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Fusarium verticillioides Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3997 |
产品特点
即开即用:用户仅需提供样品DNA模板,无需额外配制主反应混合液。
高灵敏度与特异性:采用染料法荧光定量PCR技术,可精准检测串珠镰刀菌核酸。
标准化操作:预混反应体系,减少人为误差。
试剂盒组成
2×qPCR MagicMix(含荧光染料):500 μL/管(棕色管)
荧光PCR专用模板稀释液:1 mL/瓶(黄盖)
串珠镰刀菌特异性引物混合物:100 μL/管(白盖)
阳性对照(1×10^8 拷贝/μL):50 μL/管(红盖)
使用手册:1份
实验步骤
1. 样本制备
建议使用配套基因组DNA提取试剂盒,具体方法参见提取试剂盒说明书。
2. 试剂配制与加样
解冻所有试剂,短暂离心后混匀。
按每反应孔加入10 μL 2×qPCR MagicMix、0.8 μL引物混合物、0.2 μL模板稀释液,最后加入2 μL模板DNA(阴性对照用无菌水,阳性对照用试剂盒提供标准品)。
3. PCR扩增
程序设置:预变性95℃ 5分钟;40个循环(95℃ 15秒,60℃ 30秒,72℃ 30秒);熔解曲线分析。
4. 结果分析
定量检测:通过标准曲线(阳性对照Ct值)计算待测样本拷贝数。
熔解曲线应呈现单一峰,确保扩增特异性。
注意事项
实验分区操作(样本处理、试剂配制、扩增区),避免交叉污染。
反应液需避光保存,加样时避免气泡。
使用一次性耗材,实验后消毒工作台(75%酒精或紫外照射)。
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