亚利桑那沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 亚利桑那沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Salmonella arizonae Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4046 |
检验原理
本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对亚利桑那沙门氏菌基因组高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性或定量检测。阳性对照为无传染性DNA片段，避免生物安全风险。
试剂组成
亚利桑那沙门氏菌扩增液（50μL×1管）
亚利桑那沙门氏菌反应液（950μL×1管）
阳性质控品（1×10^8拷贝/μL，50μL×1管）
阴性质控品（50μL×1管）
说明书（1份）
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存，运输需冰袋密封，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
适用仪器
兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。
自备耗材
无DNA/RNA酶的1.5mL离心管、0.2mL PCR反应管、滤芯吸头（10μL/200μL/1000μL）、离心机、移液器等。
样本要求
采集：按常规方法采集胃液分泌物、呕吐物或培养物，避免交叉污染。
保存：短期-20℃，长期-70℃（不超过6个月），运输需2~8℃冰袋。
检测方法
样本处理
按规范提取DNA，建议使用商业提取试剂盒。
阳性对照需独立操作，避免污染。
标准曲线制备（定量检测）
以10倍梯度稀释阳性对照（10^2~10^7拷贝/μL），绘制Ct值与log浓度标准曲线。
PCR扩增
反应体系：20μL（含模板DNA、反应液、扩增液）。
扩增参数（需优化）：
预变性：95℃ 2分钟
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）
结果判读
定性检测：
阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30且扩增曲线典型。
样本Ct≤35为阳性，≥40为阴性；35<Ct<40需复测。
定量检测：根据标准曲线计算样本DNA浓度。
注意事项
不同批号试剂不可混用。
操作分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区）避免污染。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
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