圣保罗沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 圣保罗沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Salmonella saintpaul Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4048 |
产品特点
即开即用:预混PCR反应体系,用户仅需提供DNA模板。
高特异性:针对Salmonella saintpaul设计的特异性引物,避免交叉反应。
定量精准:基于荧光定量PCR技术,动态范围广(10²~10⁷拷贝/μL)。
内置对照:含阳性对照(10⁹拷贝/μL),便于实验质量控制。
兼容电泳:PCR Mix含上样染料,扩增产物可直接电泳分析。
适用范围:仅限科研使用,不可用于临床诊断。
试剂盒组成
| 成分 | 编号 | 规格/体积 |
| 2×qPCR Mix(含染料) | 1.0 mL |
| stn特异性引物对 | 200 μL |
| 阳性对照(10⁹拷贝/μL)| 100 μL |
| 超纯水 | 1 mL |
| 使用手册 | - | 1份 |
实验步骤
1. 样品DNA制备
采用自选方法(如CTAB法、试剂盒提取法)从细菌样品中提取DNA,纯度要求A260/A280≈1.8~2.0。
2. PCR反应体系配制(以50 μL为例)
| 组分 | 体积 |
| 2×qPCR Mix | 25 μL |
| 正向/反向引物 | 各1 μL |
| DNA模板 | 2~5 μL |
| 超纯水 | 补足至50 μL|
3. 荧光定量PCR程序
预变性:95℃ 5 min;
扩增循环(40次):95℃ 15 s → 60℃ 30 s(采集荧光信号);
溶解曲线分析:60℃~95℃,每0.5℃升温5 s。
4. 结果分析
通过Ct值定量,或电泳验证条带大小(需与预期片段一致)。
注意事项
避免反复冻融试剂,分装后使用。
阳性对照与待测样品需分区域操作,防止污染。
DNA提取纯度直接影响检测灵敏度,建议使用磁珠法或柱式纯化试剂盒。
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