都柏林沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 都柏林沙门氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Salmonella dublin Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4054 |
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；阳性对照需单独存放，避免污染。
运输方式：低温泡沫箱加冰密封运输。
检验原理
采用SYBR Green荧光染料法实时定量PCR技术，针对都柏林沙门氏菌基因组高度保守区域设计特异性引物，通过实时监测扩增过程中的荧光信号，实现对靶标核酸的定性和定量分析。
试剂组成
都柏林沙门氏菌扩增液（含引物、dNTPs、缓冲体系等）
SYBR Green荧光染料
阳性对照（无传染性DNA片段）
荧光PCR专用模板稀释液
说明书
操作步骤
样本制备：提取待测样本DNA，建议浓度范围10^2–10^7拷贝/μL。
标准曲线制备（定量检测适用）：
将阳性对照按10倍梯度稀释（6个浓度点），标记为2–7号管，每管加入45μL稀释液混匀。
反应体系配制：
按20μL/反应配制，避光操作，避免气泡产生。
PCR程序设置：
预变性：95℃ 2分钟；
扩增循环：95℃ 15秒→60℃ 30秒（采集荧光信号），共40个循环；
熔解曲线分析：60–95℃，每0.5℃递增。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，防止交叉污染。
质量控制：
每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）和阳性对照。
熔解曲线应为单一峰，确保扩增特异性。
安全防护：使用一次性耗材，实验后工作台需用10%次氯酸或75%乙醇消毒。
性能参数
灵敏度：可检测低至10^2拷贝/μL的靶标核酸。
特异性：引物经优化，不与相近物种核酸发生交叉反应。
线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。
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