沙门氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Salmonella spp. Universal Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4057
主要成分
2×qPCR Mix（含上样染料，可直接电泳）
stn基因特异性引物对（预混液）
阳性对照（1×10^9拷贝/μL）
超纯水（1 mL）
使用手册
产品特点
即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，操作简便。
高特异性：针对沙门氏菌保守基因（如stn基因）设计引物，避免交叉反应。
定量精准：荧光定量PCR技术，动态范围广（10^2~10^7拷贝/μL）。
内置对照：含阳性对照，便于实验质控和结果分析。
操作流程
样品DNA制备
使用常规方法（如试剂盒法）提取细菌基因组DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
阳性对照稀释（可选）
按10倍梯度稀释阳性对照（如10^2~10^7拷贝/μL），独立操作以避免污染。
标记离心管，加入稀释液后涡旋混匀。
PCR反应体系（20 μL体系）
| 成分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR Mix | 10 |
| 引物混合液 | 0.8 |
| 模板DNA | 2 |
| 超纯水 | 7.2 |
PCR程序设置
预变性：95℃ 5 min
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集）
溶解曲线分析：60℃~95℃（0.5℃/sec）
注意事项
防污染：试剂分装使用，避免反复冻融；操作区与扩增区需物理隔离。
质量控制：每次实验需包含阴性对照（超纯水替代模板）和阳性对照。
数据判读：Ct值≤35且溶解曲线为单一峰时判定为阳性。
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