柏氏巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 柏氏巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Babesia bovis Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4062 |
检验原理
本试剂盒采用SYBR Green I荧光染料法，针对柏氏巴贝斯虫基因组保守区域设计特异性引物，通过实时荧光定量PCR技术对靶标核酸进行扩增检测。扩增过程中释放的荧光信号由仪器实时监测，实现定性及定量分析。
试剂组成
柏氏巴贝斯虫预混PCR反应液（含SYBR Green I）
柏氏巴贝斯虫特异性引物混合液
阳性对照（1×10^8拷贝/μL）
阴性对照（无核酸酶水）
说明书
储存条件及有效期
-20℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 7500/QuantStudio系列
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler系列
Eppendorf Mastercycler ep realplex
自备耗材与设备
无核酸酶的PCR管、吸头（10/200/1000μL）
离心机、涡旋振荡器
移液器（0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL）
样品要求
样本类型：全血、组织提取物或培养物，需避免交叉污染。
保存条件：短期（1周内）可存于-20℃，长期需-70℃保存，避免反复冻融。
运输：2-8℃冰袋运输，严禁高温暴露。
使用方法
核酸提取：按标准方法提取样本DNA，建议使用商品化核酸提取试剂盒。
反应体系配制：
每20μL反应体系含预混液10μL、引物混合液2μL、模板DNA 5μL、无核酸酶水补足至20μL。
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
数据分析：
定性：Ct值≤35判为阳性；
定量：通过标准曲线计算拷贝数。
注意事项
不同批次试剂不可混用。
实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
阳性对照需与待测样本分装保存，防止污染。
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