产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，试剂盒包含预混优化引物、荧光染料及缓冲体系。
高灵敏度与特异性：引物针对毛细线虫高度保守区域设计，避免与其他病原体DNA/RNA交叉反应。
双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于区分假阴性结果。
产品名称 | 毛细线虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Capillaria spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3957 |
操作流程
标准曲线制备（以6个10倍稀释梯度为例）
标记离心管：编号为2~7号，分别加入45 μL荧光PCR专用稀释液。
梯度稀释：
7号管加入5 μL试剂盒提供的阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得到1×10⁷拷贝/μL标准品。
依次换枪头稀释至2号管，最终获得1×10²~1×10⁷拷贝/μL系列浓度标准品。
注意事项：稀释操作需在独立洁净区域进行，避免污染。
样品DNA制备
使用兼容的核酸纯化方法提取待测样本DNA，建议设置N+2个重复（含阳性与阴性对照）。
确保DNA纯度（A260/A280比值1.8~2.0）及浓度适宜。
荧光定量PCR反应
反应体系：按20μL体系配制，含预混Master Mix、引物、模板DNA及无核酸酶水。
循环条件：
预变性：95℃ 5分钟；
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，于延伸步骤采集荧光信号）。
结果判读
定量分析：根据标准曲线计算样本中毛细线虫DNA拷贝数。
定性分析：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
注意事项
避免反复冻融试剂，开封后建议分装保存。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
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关键字： 毛细线虫通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;