马胃葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 马胃葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Staphylococcus equorum Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4079 |
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板,试剂盒包含预混反应体系。
高特异性:基于马胃葡萄球菌保守序列设计引物,无交叉反应。
高灵敏度:检测下限达几百拷贝/反应。
防污染设计:一管式闭管检测,避免扩增产物污染。
兼容性:适配常见荧光定量PCR仪(需自备10×ROX校正染料,依机型而定)。
试剂盒组成
| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |
| 2×qPCR MagicMix | 500μL(棕色管) | -20℃避光 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) | -20℃ |
| 马胃葡萄球菌引物混合物 | 100μL(白盖) | -20℃ |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL(红盖) | 单独存放,-20℃ |
| 使用手册 | 1份 | — |
运输与保存
运输条件:低温运输(冰袋或干冰)。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
注意事项:阳性对照需与其他组分分开放置,避免污染。
使用方法
1. 阳性对照稀释(建议梯度:10²~10⁷拷贝/μL)
标记6管稀释液(编号7至2),每管加45μL模板稀释液。
从7号管(初始浓度10⁸拷贝/μL)开始,依次进行10倍梯度稀释至2号管(10²拷贝/μL)。
每次稀释需更换枪头,震荡混匀后冰上暂存。
2. 反应体系配制(20μL/反应)
模板DNA:≤2μL(建议浓度10~100ng/μL)。
2×qPCR MagicMix:10μL。
引物混合物:2μL。
ROX校正染料:依仪器型号添加(参考手册)。
ddH₂O:补足至20μL。
3. 扩增程序
预变性:95℃ 3分钟。
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)。
注意事项
操作需在独立洁净区域进行,避免气溶胶污染。
阳性对照稀释与样品处理需分时分区操作。
废弃耗材需按生物危害废物处理。
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