着色霉染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，适用于一步法实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测，整合反转录与定量扩增于单管反应体系，减少操作步骤并降低污染风险。适用于RNA/DNA模板的高灵敏度检测，支持动植物、微生物、细胞等样本的核酸定量分析。

产品组分

2× Advanced SG Buffer：预混反应缓冲液（含SYBR Green I染料、dNTPs、Mg²⁺等）

UH Enzyme Mix：耐热反转录酶与HotStart Taq DNA聚合酶复合物

RNase-free H2O：无核酸酶水

技术参数

灵敏度

RNA模板：高表达靶标检测限达0.1 pg，中等表达靶标为1 pg；DNA模板可检测至单拷贝。

病毒RNA检测限达E2级别（依靶标而异）。

重复性与精准度

复孔间Ct值差异小（CV < 5%），可分辨2倍浓度差异。

稳定性

预混液4℃保存24小时性能稳定，长期储存需-20℃避光（保质期24个月）。

操作流程

反应体系配制（以20 μL为例）：

2× SG Buffer 10 μL

引物（10 μM）各0.4 μL

模板RNA/DNA ≤ 2 μL

UH Enzyme Mix 0.5 μL

补足RNase-free H2O至20 μL。

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟（RNA模板需此步骤）。

预变性：95℃ 5分钟。

扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环），信号采集于延伸阶段。

数据分析：

定量检测：通过标准曲线计算模板浓度。

定性检测：Ct值≤35为阳性，≥40为阴性；35-40需复测确认。

注意事项

仅限科研使用，不适用于临床诊断。

避免反复冻融，建议分装保存。

不同仪器需根据ROX类型调整基线（No/Low/High Rox）。

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