产品基本信息
规格：50次反应/盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤3次）。
运输条件：低温（≤4℃）、避光。
有效期：12个月（生产日期见包装标签）。
适用范围：仅供科研使用，不可用于临床诊断或动物检测。
产品名称 | 尼泊尔葡萄球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Staphylococcus nepalensis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4089 |
质控标准
阴性质控品：检测结果应为阴性（无指数扩增期，Ct≥40或无Ct值）。
阳性质控品：检测结果应为阳性（明显指数扩增期，Ct≤35）。
有效性判定：同一实验中阴/阳性质控需同时满足上述条件，否则实验无效。
试剂盒组分
PCR反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、荧光染料等（需按实际组分调整）。
DNA聚合酶：热启动酶，需离心后使用。
阴性质控品：无核酸酶水。
阳性质控品：含S. nepalensis特异性片段。
说明书：1份。
实验步骤
样本处理（样本处理区）：
待检样本需提取DNA（推荐使用商业化核酸提取试剂盒）。
阴/阳性质控品可直接使用，无需提取。
反应体系配制（PCR准备区）：
每反应管加入：
PCR反应液 19 μL
DNA聚合酶 1 μL
短暂离心混匀后分装至PCR管。
加样（样本处理区）：
加入5 μL待测DNA或质控品至对应反应管，盖紧离心（6000 rpm，10秒）。
扩增程序设置（扩增区）：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
基线设定：建议选择6-15循环（根据扩增曲线调整）。
结果分析
阈值设定：以扩增曲线指数期起始点上方3-10倍标准差为基准。
Ct值判定：
阳性：Ct≤35且曲线呈典型S型；
阴性：无Ct值或Ct≥40。
注意事项
实验分区操作，避免污染。
试剂使用前需完全解冻并混匀，避免反复冻融。
不同仪器需优化扩增参数，建议优先选用ABI 7500、Bio-Rad CFX等机型。
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