检验原理
本试剂盒基于SYBR Green荧光染料法实时定量PCR技术，针对不明血吸虫基因组高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测靶标核酸的扩增过程，实现定性及定量检测。扩增过程中，荧光信号强度与模板浓度成正比，通过标准曲线计算样本中目标核酸的拷贝数。
产品名称 | 不明血吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Schistosoma sp. Unidentified Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4098 |
试剂组成
不明血吸虫扩增液：50μL×1管
不明血吸虫反应液：950μL×1管
阳性质控品（无传染性DNA片段）：50μL×1管（1×10^8拷贝/μL）
阴性质控品（无核酸酶水）：50μL×1管
说明书：1份
注意事项
不同批号组分不可混用。
试剂盒内组分可满足50次检测，需避免反复冻融（≤7次）。
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存，有效期12个月；运输需使用干冰或-20℃冰袋。
适用仪器
兼容ABI系列（如7500）、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler、Eppendorf Mastercycler等荧光定量PCR仪。
自备耗材与设备
无核酸酶离心管（0.2mL PCR管、1.5mL离心管）
滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）
离心机、涡旋振荡器、移液器
样品要求
样本类型：粪便、血液或组织样本（需符合《寄生虫病样本采集规范》）。
保存条件：短期-20℃保存，长期需-70℃；避免反复冻融。
运输：2~8℃冰袋运输，严禁高温暴露。
使用方法
样本处理
按标准方法提取样本DNA（推荐柱提法或磁珠法）。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释（10^2~10^7拷贝/μL）制备标准曲线。
PCR反应体系配制（样本处理区）
每反应体系20μL：
反应液 18μL
扩增液 1μL
模板DNA 1μL
扩增程序
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60~95℃（验证扩增特异性）
结果判读
定性：Ct值≤35且熔解曲线为单峰判为阳性。
定量：通过标准曲线计算模板拷贝数。
局限性
仅用于科研，不可作为临床诊断依据。
需严格分区操作（样本处理区、扩增区），避免污染。
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