温和气单胞菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 温和气单胞菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Aeromonas sobria Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4239 |
检验原理
本试剂盒采用染料法（SYBR Green I）荧光定量PCR技术，通过特异性引物扩增温和气单胞菌的保守基因序列。扩增过程中，SYBR染料与双链DNA结合发出荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定量分析。灵敏度可达100拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级，兼具定性与定量功能。
试剂组成
2× SYBR qPCR MasterMix：含DNA聚合酶、dNTPs及优化缓冲液（0.5 mL/管）。
荧光PCR专用模板稀释液：用于标准品梯度稀释（1 mL/管）。
阳性对照：含温和气单胞菌靶序列，用于验证实验有效性。
阴性对照：无DNA模板，排除污染干扰。
性能特点
高特异性：引物针对温和气单胞菌独特保守区设计，避免交叉反应。
高灵敏度：最低检测限100拷贝/反应。
快速便捷：即开即用，无需额外优化。
稳定性：-20℃保存下有效期12个月，运输需低温条件。
操作步骤
样本制备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系：按20 μL体系混合模板DNA、引物、MasterMix及稀释液。
PCR程序：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
数据分析：通过标准曲线计算样本中目标基因拷贝数。
注意事项
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
实验需在无核酸污染环境下进行，建议使用UDG酶防污染体系。
定量分析时需设置重复孔及标准品梯度。
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