马尔太虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 马尔太虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Marteilia spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4270 |
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对马尔太虫通用基因高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量分析。阳性样本中，PCR扩增释放荧光信号，仪器通过检测信号强度输出结果。
试剂盒组成
| 组分名称 | 规格/数量 |
| 马尔太虫通用扩增液 | 50μL ×1管 |
| 马尔太虫通用反应液 | 950μL ×1管 |
| 阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）| 50μL ×1管 |
| 阴性质控品 | 50μL ×1管 |
| 说明书 | 1份 |
注：不同批号组分不可混用；试剂量满足50次检测。
储存与有效期
储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。
有效期：12个月（自生产日期起）。
运输：低温（-20℃）运输，需冰袋保护。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI系列（如7500、StepOnePlus）
Bio-Rad（CFX系列）
Roche LightCycler
Eppendorf Mastercycler
MX3000P/3005P
自备耗材：无核酸酶离心管（0.2mL/1.5mL）、滤芯吸头（10/200/1000μL）、离心机、移液器等。
样本要求
样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（需符合《临床微生物样本采集规范》）。
保存条件：
短期：-20℃（≤1个月）；
长期：-70℃（≤6个月）；
运输：2~8℃冰袋，禁止反复冻融。
操作步骤
1. 样本处理（样本制备区）
DNA提取：使用兼容的核酸提取试剂盒或实验室自选方法纯化样本DNA。
标准曲线制备（阳性对照稀释）：
按梯度稀释阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）至1×10⁷~1×10²拷贝/μL，用于标准曲线建立。
2. PCR反应体系配制（反应设置区）
每20μL反应体系包含：
2×qPCR MagicMix 10μL
引物混合液 2μL
模板DNA 2μL
DEPC-H₂O补足至20μL。
3. 上机检测（扩增区）
按仪器说明书设置程序（推荐：预变性95℃ 3min；40循环×95℃ 15s→60℃ 30s）。
注意事项
分区操作：严格区分样本处理、反应配制及扩增区域，避免交叉污染。
质控要求：每批次检测需包含阴/阳性质控。
结果判读：Ct值≤35且扩增曲线呈S型为阳性；阴性对照无扩增。
产品特点
高特异性：引物针对马尔太虫保守序列设计，无交叉反应。
高灵敏度：检测限低至数百拷贝/反应。
便捷性：即开即用，一管式检测减少污染风险。
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