预期用途
本试剂盒适用于咽拭子、血清、组织渗出液等临床样本中扎伊尔埃博拉病毒RNA的特异性检测。检测结果需结合临床症状及其他实验室指标综合判断，不可单独作为确诊或排除依据。
产品名称
扎伊尔埃博拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Zaire Ebola Virus Dye-based qRT-PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4149
检测原理
采用实时荧光定量RT-PCR技术，通过逆转录酶将病毒RNA逆转录为cDNA，再通过Taq DNA聚合酶进行扩增。反应体系包含预混的酶、特异性引物、荧光标记探针及缓冲液，实现单管闭管操作，有效避免污染。荧光信号随扩增进程实时累积，通过阈值循环数（Ct值）定量分析病毒载量。
主要组成
预混RT-PCR反应液（含逆转录酶、Taq酶、dNTPs、缓冲液）
扎伊尔埃博拉病毒特异性引物及探针
阳性对照（灭活病毒RNA）
阴性对照（无核酸酶水）
RNase-free耗材（如适用）
储存条件及有效期
-20℃避光保存，有效期12个月。避免反复冻融（建议分装保存）。
操作步骤
样本处理：按规范提取样本RNA，避免降解。
反应体系配制：取预混液加入模板RNA，离心混匀。
扩增程序设置：按以下条件运行：
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 2分钟
扩增循环（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
结果判读：根据标准曲线计算Ct值，Ct≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
注意事项
实验需在生物安全二级（BSL-2）及以上实验室进行。
试剂开封后需尽快使用，避免污染。
若阳性对照无信号或阴性对照出现扩增，实验无效需重测。
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