产品概述

本试剂盒采用SYBR Green I染料法荧光定量RT-PCR技术,专为跳跃病病毒(Louping Ill Virus)RNA检测设计。通过优化的一步法反应体系,实现反转录(RT)与实时定量PCR(qPCR)在同一反应管内完成,减少操作步骤,降低污染风险。试剂盒包含高灵敏度酶预混液,可检测低至0.1 pg的病毒RNA,适用于临床样本、环境监测及科研分析。
产品名称 | 跳跃病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Louping Ill Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4177 |

产品组分

| 组分编号 | 组分名称 | 规格(20 T) | 规格(200 T) |
| A | 2× RT-qPCR Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |
| B | 耐热逆转录酶 & HotStart Taq Mix | 20 μL | 200 μL |
| C | RNase-free H₂O | 250 μL | 2×1.25 mL |
| D | 跳跃病病毒阳性对照(非传染性DNA片段) | 50 μL | 50 μL |
技术参数

灵敏度:可检测0.1 pg病毒RNA(高表达靶标)或单拷贝DNA。
特异性:引物针对跳跃病病毒高度保守区设计,无交叉反应。
线性范围:定量检测覆盖5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
稳定性:预混液在4℃下可保存24小时,性能无显著变化。
操作步骤

标准曲线制备(以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例):
标记6管,分别加入45 μL稀释液,梯度稀释阳性对照(初始浓度10⁸拷贝/μL)。
涡旋混匀后冰上保存,避免污染。
反应体系配制(20 μL/反应):
10 μL 2× Buffer + 0.5 μL酶预混液 + 1 μL引物(10 μM) + 2 μL模板RNA + 6.5 μL H₂O。
程序设置:
反转录:50℃ 15分钟 → 预变性:95℃ 5分钟 → PCR循环(95℃ 10秒,60℃ 30秒,40次)。
注意事项

操作需在独立洁净区域进行,避免气溶胶污染。
阳性对照为非传染性片段,不可用于活病毒培养。
本产品仅限科研使用,临床诊断需经额外验证。
应用案例
动物组织检测:成功用于绵羊脑组织样本中跳跃病病毒载量分析,熔解曲线单一。
灵敏度验证:对10⁰~10⁴ TCID₅₀/mL病毒培养液检测,Ct值与滴度呈线性相关(R²>0.99)。
存储与运输
保存条件:-20℃避光,有效期12个月。
运输方式:冰袋低温配送。
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