滴虫（毛滴虫）通用染料法荧光定量PCR试剂盒

滴虫（毛滴虫）通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于滴虫（毛滴虫）DNA的定性及定量检测，具有高灵敏度和特异性。适用于科研用途，需配合实验室分区操作规范使用。

试剂盒组成

PCR MagicMix 3.0（含荧光染料）：1 mL

超纯水：1 mL

滴虫特异性引物混合液：100 μL

阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL）：50 μL

核酸释放剂（试用装）：20次用量

使用手册：1份

储存与运输

低温运输（-20℃），保存期限12个月。

阳性对照需单独存放，避免污染其他组分。

实验前准备

自备材料：样本DNA提取试剂、离心机、荧光定量PCR仪、一次性耗材（吸头、手套等）。

分区要求：样本处理、试剂配制、扩增反应需在独立区域进行，防止交叉污染。

操作步骤

1. 样本处理（样本制备区）

使用核酸提取试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

2. 标准曲线制备（可选，定量检测时需执行）

按10倍梯度稀释阳性对照（1×10⁸ 拷贝/μL至1×10³ 拷贝/μL），共6个浓度点。

3. 试剂配制（试剂准备区）

按以下体系配制反应液（单次20 μL体系）：

PCR MagicMix 3.0：10 μL

引物混合液：2 μL

超纯水：6 μL

模板DNA：2 μL

4. PCR扩增（核酸扩增区）

程序设置：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

5. 结果分析

定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量检测：根据标准曲线计算样本DNA浓度（log值转换）。

注意事项

所有组分使用前需充分融化、混匀并短暂离心。

反应液避光保存，避免气泡干扰。

实验后需用10%次氯酸或75%乙醇清洁工作台及移液器。

本试剂盒仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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