产品概述
本试剂盒采用SYBR Green I 荧光染料法，通过实时荧光定量PCR技术（qPCR）特异性检测猪疱疹病毒2型（SuHV-2，即猪巨细胞病毒）的核酸。适用于猪血清、组织样本（如肺、淋巴结、唾液腺）或细胞培养物中的病毒DNA定量分析，具有高灵敏度、高特异性和快速检测等特点。
产品名称 | 同猪疱疹病毒2型)猪巨细胞病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Porcine Cytomegalovirus (Suid Herpesvirus 2) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4206 |
检测原理
样本DNA提取：从样本中提取病毒DNA。
qPCR扩增：
使用特异性引物靶向SuHV-2保守基因区域（如gB基因）。
SYBR Green I染料嵌入双链DNA中，荧光信号随扩增产物增加而增强。
实时监测：通过荧光定量PCR仪动态监测扩增曲线，结合标准曲线计算病毒载量（copies/μL）。
组分列表（48T规格）
| 组分 | 体积/数量 | 保存条件 |
| qPCR预混液（含SYBR Green I） | 1 mL × 1管 | -20℃避光 |
| SuHV-2特异性引物混合液 | 100 μL × 1管 | -20℃ |
| DNA提取试剂（裂解液+蛋白酶K） | 各1套 | -20℃ |
| 阳性对照（SuHV-2质粒） | 50 μL × 1管 | -20℃ |
| 阴性对照（无核酸水） | 1 mL × 1管 | -20℃ |
| RNase-Free DNase/RNase-Free水 | 1 mL × 1管 | 室温 |
操作步骤
1. 样本DNA提取
取200 μL血清或30 mg组织匀浆液，按DNA提取试剂盒说明操作，最终溶于50 μL无核酸水。
2. qPCR反应体系配制（25 μL体系）
| 组分 | 体积 |
| qPCR预混液 | 12.5 μL |
| 引物混合液 | 2.0 μL |
| 模板DNA | 5.0 μL |
| 无核酸水 | 补至25 μL |
3. qPCR程序设置
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 信号采集 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 | 无 |
| 扩增 | 95℃ | 10 sec | 40 | 每循环结束时 |
| | 60℃ | 30 sec | | |
| 熔解曲线 | 65℃→95℃ | 0.5℃/sec | 1 | 连续 |
结果判读
阳性：
Ct值 ≤ 35，且熔解曲线为单一峰值（Tm值约 85±1℃）。
可疑：
35 < Ct值 < 38，建议重复检测。
阴性：
Ct值 ≥ 38 或无扩增曲线。
注意：阴性对照应无扩增，阳性对照Ct值需在15~25之间。
性能参数
灵敏度：最低检测限10 copies/μL
特异性：不感染猪圆环病毒（PCV）、猪瘟病毒（CSFV）、伪狂犬病毒（PRV）等。
重复性：CV值 < 5%（批内/批间）。
注意事项
实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免污染。
试剂使用前彻底解冻混匀，避免反复冻融。
熔解曲线分析可区分非特异性扩增。
适用于科研用途，临床诊断需经当地法规许可。
保存与运输
保存条件：-20℃避光，有效期12个月。
运输：冰袋低温运输。
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