细胞简介：
人结肠平滑肌分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M”，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展，对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平，要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞，由于影响因素单一，是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
产品名称 | 人结肠平滑肌细胞 | 组织来源 | 结肠组织 |
英文名称 | Human Colonic Smooth Muscle Cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4500 | 生长特性 | 贴壁 |
产品信息:
产品名称 人结肠平滑肌细胞
组织来源 结肠组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的人结肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人结肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
人结肠平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤：
1. 细胞复苏
运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。
复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。
2. 细胞传代
传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤：
弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率：每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液：使用无血清冻存液。
冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品：
小鼠肌腱成纤维细胞 Mouse Tendon Fibroblast Cells | AF750标记的神经元核抗原抗体 |
SCaBER人膀胱鳞癌细胞 | 细菌脂肪酶（LIPASE）活性定性染色试剂盒 |
酒类比色法定量检测试剂盒 | 组织5－焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶（mevalonate 5-pyrophosphate decarboxylase）活性比色法定量检测试剂盒 |
石蜡切片组织HISTONE H3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | ?细胞COLLAGEN III蛋白表达荧光定量检测试剂盒 |
食物环（cyclamate）含量薄层色谱法定性检测试剂盒 | 白介素8抗体 |
组织HPV6（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6）病毒定性检测试剂盒 | KIAA0907蛋白抗体 |
钾离子通道多聚体结构域蛋白16抗体 | FAM200A蛋白抗体 |
睾丸特异定蛋白质编码Y1抗体 | 宋果灵509-24-0 |
转染抑癌基因KLF6抗体 | 11-去氧泽泻醇B155073-73-7 |
同源三聚体锌指蛋白ZHX3抗体 | 去氢粗毛甘草素C199331-35-6 |
磷酸化Ephrin B抗体 | 人结肠平滑肌细胞五味子丙素61301-33-5 |
组织肌酸激酶（CK）总活性酶连续循环比色法 | 兔胎盘绒毛膜滋养层细胞 Rabbit Placental Amniotic Cells |
细胞可溶性膜蛋白（纯提）制备试剂盒 | NCI-H1155细胞 |
产品注意事项：
无菌操作是生命线：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。
消化是关键步骤：
控制时间：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时，严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择：部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子：
基础培养基：推荐使用专用培养基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/链霉素）。
生长因子：为促进生长，可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。
细胞密度与传代：
最佳传代密度：建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理：
定期检查：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。
关键字： 人结肠;平滑肌细胞;
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