马传染性贫血病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 马传染性贫血病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Equine Infectious Anemia Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4348 |
产品概述
马传染性贫血病毒（Equine Infectious Anemia Virus, EIAV）是一种逆转录RNA病毒，会引起马传染性贫血病，其特征为间歇性发烧、消瘦、进行性衰弱、贫血、出血和浮肿，无烧期间症状逐渐减轻或暂时消失。本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术开发，可实现马传染性贫血病毒的快速定性检测和精准定量分析，对该病的预防和检疫具有重要作用。
产品特点
即开即用：预混优化引物、探针及反应体系，用户仅需提供样品DNA模板。
高灵敏度与特异性：引物针对EIAV高度保守区设计，避免与其他病原体核酸交叉反应，检测限低至10^2拷贝/μL。
双重质控：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，辅助鉴别假阴性结果。
定量与定性兼容：标准曲线线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL），支持绝对定量分析。
稳定可靠：严格质控生产，批间差异小，适配常见荧光定量PCR仪。
操作步骤
标准曲线制备（示例：10^2–10^7拷贝/μL梯度）
标记6管，分别加入45 μL荧光PCR专用稀释液。
取5 μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入第7管，梯度稀释至第2管（10^3拷贝/μL）。
注：稀释需在独立区域操作，避免气溶胶污染。
反应体系配制（20 μL/反应）
模板DNA：2 μL
预混Master Mix：10 μL
引物探针混合液：2 μL
无核酸酶水：6 μL
PCR程序设置
逆转录：50℃ 15分钟（若检测RNA需此步骤）。
预变性：95℃ 3分钟。
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。
注意事项
样本要求：建议使用抗凝血或组织样本，提取DNA/RNA时避免降解。
污染防控：分区操作（试剂准备、样本处理、扩增区），使用带滤芯枪头。
结果判读：Ct值≤35且扩增曲线呈“S”形视为阳性；阴性对照应无信号。
局限性：仅限科研用途，不可用于临床诊断或动物疫病防控决策。
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