粪产碱杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Alcaligenes faecalis Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4350
产品概述
本试剂盒专为快速、灵敏检测粪产碱杆菌（Alcaligenes faecalis）设计，采用染料法荧光定量PCR技术，适用于科研用途。试剂盒包含优化引物、探针及对照品，确保高特异性和重复性，可检测50次20μL体系的反应。
产品组成
PCR反应预混液：含荧光染料、dNTPs、聚合酶及缓冲体系。
引物与探针：针对粪产碱杆菌高度保守区设计，避免交叉反应。
阳性对照：重组质粒标准品（1×10²~1×10⁸拷贝数/mL），用于标准曲线建立。
阴性对照：RNase-free ddH₂O，排除污染干扰。
ROX参比染料（可选）：校正孔间荧光信号偏差。
保存与运输
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输条件：低温干冰运输，有效期12个月。
实验流程
样本制备：提取待测样本DNA（如粪便基因组）。
反应体系配制（20μL/反应）：
预混液10μL
引物/探针混合液2μL
模板DNA 2μL
ddH₂O补至20μL
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）
数据分析：通过标准曲线计算样本中粪产碱杆菌拷贝数。
性能参数
灵敏度：最低检测限1×10²拷贝数/mL。
特异性：不与常见肠道菌群（如大肠杆菌、乳酸菌）发生交叉反应。
注意事项
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作需在无菌环境下进行，避免气溶胶污染。
建议重复检测3次以提高数据可靠性。
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