产品用途
适用于禽类全血、含白细胞的血浆或血清、脾脏、肝脏、肾脏等样本中禽白血病病毒RNA的检测，用于临床病原学辅助诊断及科研。
产品名称 | 禽白血病病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Leukosis Virus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4227 |
检验原理
采用一步法荧光定量RT-PCR技术，通过特异性引物和荧光探针靶向扩增ALV保守基因序列，实现高灵敏度的定量或定性检测。
试剂组成
（50T/盒规格）
ALV反应液：500μL×2管
酶混合液：50μL×1管
阳性质控品（无传染性DNA片段）：50μL×1管
阴性质控品：250μL×1管
荧光PCR专用模板稀释液：1mL×1瓶
注意：不同批号组分不可混用。
储存与运输
储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5次），有效期12个月。
运输要求：泡沫箱加冰密封低温运输，阳性质控品需单独放置以防污染。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括但不限于：
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf RealPlex
样本要求
采集类型：疑似感染禽类的全血、抗凝血浆/血清或组织（脾、肝、肾）。
保存与运输：样本需-20℃保存，低温运输，避免反复冻融。
操作注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，防止交叉污染。
试剂准备：使用前所有组分需完全融化，短暂离心混匀，反应液避光保存。
防污染措施：
使用一次性吸头、手套及专用工作服。
实验后工作台需用10%次氯酸或75%乙醇消毒。
扩增设置：避免气泡，确保管盖密封。
标准曲线制备（定量检测）
按10倍梯度稀释阳性质控品（10^2~10^7拷贝/μL），独立操作避免污染。
每反应体系20μL，含5μL模板DNA。
性能参数
灵敏度：可检测低至10^2拷贝/μL的ALV RNA。
特异性：引物探针针对ALV保守区设计，无交叉反应。
线性范围：定量检测覆盖5个数量级。
结果判读
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。
可疑：Ct值35~40，建议重复检测。
阴性：无扩增曲线或Ct值≥40。
局限性
仅限科研使用，临床诊断需结合其他指标。
样本质量（如降解或抑制物）可能影响结果。
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